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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究
品牌:百奥莱博
编号:XH070
规格:12ml
产地:国产|进口
别名:两性电解质两性电解质载体(PH5-8):Ampholyte solution、Ampholine。
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
欲了解更多载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)
编号:XH105
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化二抗:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
7, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG/山羊的免疫组化实验. DAB及FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖*酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,刚可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化二抗浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
如果想用荧光观察,请接下面步骤,如果想用DAB显色,请跳过6-7。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
如果想用DAB显色,请接8。
8.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
9.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究关键词:两性电解质两性电解质载体(PH5-8):Ampholyte solution、Ampholine,百奥莱博,载体两性电解质PH5-8
吐温40 Sodium Cyclamate 9005-66-7
胰凝乳蛋白酶(猪) Cyclophosphamide monohydrate 9004-07-3
ARB14067 ALV J-Ab elisa测定使用说明书
ARB10516 人白细胞介素35(IL-35)ELISA代测服务 Human interleukin35,IL-35 ELISA KIT
NF-239 羊抗人IgG荧光抗体
F030424 胶体金标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*GOLD
94-75-7 2,4-D 2,4-二**氧乙酸
T4 DNA连接酶 Sodium succinate dibasic hexahydrate 9015-85-4
F030233 HRP标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
4-**甲*(代"酸") lactitol 586-76-5
CBZ-L-精*酸 Acriflavine 1234-35-1
ARB13237 小鼠蛋白*(代"磷")酸酶(PP)血清中含量检测 Mouse protein phosphatase,pp ELISA KIT
BTN120508 肠激酶(轻链) Enterokinase,Light Chain
ARB10118 人L-乳酸脱*酶(L-LDH)elisa测定使用说明书 Human l-lactate dehydrogenase,l-ldh ELISA KIT
ARB12686 大鼠醛固酮(ALD)ELISA代测服务 Rat aldosterone,ald ELISA KIT
DAB法显色试剂盒"
ARB12802 小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)Elisa方法检测 Mouse amyloid beta Peptide 1-42,aβ1-42 ELISA KIT
BTN130584 小鼠抗T7标签单抗 Anti T7-Tag Mouse Mab
载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究关键词:两性电解质两性电解质载体(PH5-8):Ampholyte solution、Ampholine,百奥莱博,载体两性电解质PH5-8
·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号:XH014
规格:100T/400T
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA片段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购载体两性电解质PH5-8 蛋白质研究。
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文献和实验1 载体两性电解质必需具备的条件 (i)在等电点处必需有足够的缓冲能力,以便能控制pH梯度,而不致被样品蛋白质或其他两性物质的缓冲能力改变pH梯度的进程。 (ii)在等电点必需的足够高电导,以便使一定的电流通过,而且要求具备不同pH值的载体有相同的电导系数,使整个体系中的电导均匀,如果有局部电导过小,就会产生极大的电位降,从而其他部分电压就会太小,以致不能保持梯度,也不能使应聚焦的成分进行电迁移,达到聚焦。 (iii)分子量要小,便于与被分离的高分子物质
载体两性电解质必备的条件:1.可溶性要好,为了保证等电聚焦过程中PH梯度的形成和蛋白样品的迁移,载体两性电解质必须具有很好的溶解性能。2.紫外吸收低,不发荧光。由于制备分离时,检测蛋白质的方法通常是测量280cm的吸光度,因此要求载体两性电解质在280cm的吸光度尽可能低。3.在等电点处必需有足够的缓冲能力,以便能控制pH梯度,而不致被样品蛋白质或其他两性物质的缓冲能力改变pH梯度的进程。4.在等电点必需的足够高电导,以便使一定的电流通过,而且要求具备不同pH值的载体有相同的电导系数,使整个
哪些蛋白质数据库最受研究者欢迎?GEN网站罗列出16个,包括BioGRID, DDBJ, ExPasy, Gepasi, IntAct, KEGG, MINT, MS-Fit, NCBI, STRING, Uniprot等,详细列表请见如下内容。 BioGRID数据库于2003年建立,是一个有关于蛋白质—蛋白质以及基因相互作用的数据库。 DDBJ数据库,于1984年建立,是世界三大DNA 数据库之一,与NCBI的GenBank,EBI的EMBL数据库共同组成国际DNA数据
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