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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bacterial Protein Extraction Kit
- 库存:
795
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京WE0261型细菌蛋白抽提试剂盒厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京WE0261型细菌蛋白抽提试剂盒厂家,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:Bacterial Protein Extraction Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 细菌蛋白抽提试剂盒 | WE0261 | 100次 |
编号:WE0261
英文名:Bacterial Protein Extraction Kit
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎,有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP,Western Blot,蛋白纯化等下游操作。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| Bacterial Protein Extraction Reagent | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 1ml |
| Lysozyme(50 mg/ml) | 200μl |
| DNaseⅠ(1000U/ml) | 100μl |
保存条件:Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统,蛋白提取后的纯化操作,请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液,可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株,如果抽提效果不理想,可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况,可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。
使用方法:
细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟,收集菌体。
2、可选步骤:每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail,涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例,向菌体沉淀中加入抽提液,充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后,室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白),进行蛋白定量及下游实验。
注意:如目的蛋白以包涵体形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。
昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重,按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后,冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟,分离可溶性蛋白。
常见问题分析
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 目的蛋白不溶 | 目的蛋白表达为包涵体 | 优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液 |
| 在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I | ||
| 加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来 |
温度过低 | 将使用试剂恢复至室温 |
| Lysozyme 活性降低或失活 | 加入更多的Lysozyme 或更换新的酶 | |
| 提取物粘度高 | DNase I 活性降低或失活 | 加入更多的DNase I 或更换新的DNase I |
| 将*离子的终浓度增加至2 mM | ||
| 蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中 |
蛋白量过大 | 加入Lysozyme及DNase I |
| 蛋白抽提试剂有沉底析出 | 温度过低 | 将蛋白抽提试剂恢复至室温 |
储存条件:-20℃
北京WE0261型细菌蛋白抽提试剂盒厂家专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:Bacterial Protein Extraction Kit,细菌蛋白抽提试剂盒,WE0261
细菌蛋白抽提试剂盒为高校实验室,各大科研单位专用试剂,不得用于生产或者其它用途,本公司提供各种品牌的进口的试剂来满足不同客户的需求,欢迎前来订购!
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| WE0142 | 核酸扩增(PCR) | 快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料) |
| WE0273 | 蛋白质研究 | 微量BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0348 | 一抗 | 抗c-Myc标签多克隆抗体 |
| WE0280 | 蛋白质研究 | 蛋白分子量Marker |
| WE0269 | 蛋白质研究 | GST琼脂糖凝胶 |
| WE0245 | 核酸电泳和回收 | 1kb DNA Ladder |
| WE0331 | 免疫检测 | 抗GST标签琼脂糖介质 |
| WE0131 | 核酸扩增(PCR) | 高效cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0377 | HRP标记抗体 | HRP标记山羊抗人IgA |
| WE0303 | 蛋白质研究 | 显影粉 |
| WE0391 | 二抗 | AP标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0213 | 工具酶 | DNase I(不含RNase) |
| WE0229 | 基因结构和功能 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Illumina平台) |
| WE0372 | HRP标记抗体 | HRP标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| WE0357 | 一抗 | 抗GAPDH多克隆抗体 |
| WE0385 | FITC标记抗体 | FITC标记兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0247 | 克隆与表达 | TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶) |
| WE0137 | 核酸扩增(PCR) | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 |
| WE0152 | 核酸扩增(PCR) | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料) |
| WE0332 | 一抗 | 抗c-Myc标签单克隆抗体 |
| WE0404 | RNA纯化 | RNA样本保存液 |
| WE0236 | 工具酶 | 大片段Bst DNA聚合酶 |
| WE0291 | 蛋白质研究 | 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1) |
| WE0159 | 核酸扩增(PCR) | dNTP混合溶液(10 mM) |
| WE0325 | 细胞凋亡与增殖 | Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 |
| WE0268 | 蛋白质研究 | Protein A+G琼脂糖凝胶 |
| WE0194 | RNA纯化 | 病毒RNA提取试剂盒 |
| WE0335 | 一抗 | HRP标记抗His标签单克隆抗体 |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京WE0261型细菌蛋白抽提试剂盒厂家。
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文献和实验电泳图: 图1 泳道1与2,在-80度保存一个月后的提取结果。第M泳道:标准的Hela细胞RNA 推荐客户二: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 百泰克公司的血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)产品,在提取组织病料中细胞总RNA时,发现较本实验常用的提取方法在总RNA量和提取时间上(节约了三分之一的时间)都得到的了优化,且价格优惠,是性价比较高产品。下图是提取完后RNA凝胶电泳的比较结果(图中2为血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒
背景: 全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作,根据不同的下游的实验和分析,历史上使用方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,硅胶模离心柱吸附法,磁珠法,等等。各种方法都有自己的优点和缺点。不同的方法适合不同的下游实验需求。一直以来血样,尤其是病例血样的采集是一个很繁琐和高成本的问题。随着时代的发展,各种成本更是急剧上升,准确、清晰的采集血样的成本急剧上升的后果是研究工作者非常迫切需要一种试剂盒,可以一次性的尽可能的将采集到的最大血样量(1-10ml)的DNA
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