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- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
361
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")总RNA提取试剂盒哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:总RNA提取试剂盒哪里买
品牌:百奥莱博
规格:50T/100T
产地:国产|进口
编号:XH011
原理简介
本试剂以本公司所产总RNA提取试剂(TRIzol)为基础,结合玻璃奶核酸吸附技术,使最终提取的RNA试剂纯度更高。
注意事项
1. 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2. 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3. 所有离心步骤最好用低温离心机在4℃条件下离心,如果实验室没有低温离心机,也可以使用常温离心机,但所提得的RNA可能会降解严重些。
操作步骤
准备工作:使用前请先开启一瓶新的无水乙醇,倒入漂洗液中,倒满至离瓶口约0.5-1ml,盖上瓶口,摇匀。
1.样品处理:
a,植物组织:以叶片RNA提取为例。取新鲜叶片在液氮中充分研磨,随后把研磨后的粉末迅速加入到裂解液中。大约50-100mg叶片使用1ml 裂解液。
b,动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例。取新鲜或-70℃冻存组织,大约10-30mg组织加1ml裂解液,用一次性组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
a,单层培养细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每10cm2面积加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
c,细胞悬液:离心收集细胞。每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液。
d,血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置2分钟,8,000-10,000rpm 离心1分钟。彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。每200 ul血液收集的白细胞沉淀加入1 ml裂解液。
2.混匀,将匀浆样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3.向匀浆样品中加0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟,使其自然分相。如不能旋涡混匀,可手动颠倒混匀2分钟代替。
4.2-8℃ 12,000 rpm离心10分钟。样品会分成两层,RNA主要在上层的水相中,把水相(通常为500μl)转移到新DEPC处理管中。如果上清还有沉淀,可再次离心。
5.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟,加入50-100ul洗脱缓冲液混匀溶解,静置5分钟。离心,取上清为所提RNA。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
我公司的总RNA提取试剂盒哪里买,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·抗荧光衰减封片剂
编号:XH103
规格:5ml/25ml
抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。以甘油为基础,加入抗荧光淬灭剂,有强烈的防荧光衰减作用,用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后,样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。本试剂操作简单,在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液,盖上盖玻片就可以了。当然,此产品不象树胶一样能固定盖玻片。所以封片后,如果方面,可以在四周封一丝中性树胶类物质以固定盖玻片。
保存条件:
储存条件:2~8℃,有效期18个月。
使用说明:
1. 贴壁细胞样品:
A. 染色完毕后,吸尽液体。
B. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片液,尽量避免气泡。
C. 随后就可在荧光显微镜下观察样品了。
2. 组织切片:
A. 染色完毕后,吸尽液体。
B. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于组织切片上,盖上盖玻片,让切片接触封片液,尽量避免气泡。
C. 随后就可在荧光显微镜下观察样品了。
3. 其它样品:
其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
注k注意事项:
1. 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。
2. 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭和衰减,但无法避免,请尽量避光和及时观察。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.此产品不象树胶一样能固定盖玻片。所以封片后,如果方面,可以在四周封一丝中性树胶类物质以固定盖玻片。
·羊抗小鼠IgG(纯化抗体)
编号:XH093
规格:1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白小鼠IgG,用此小鼠IgG免疫山羊,经过多次免疫后,测得山羊血清的效价达到要求后,动脉一次取血,静置得到血清,血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白,再用硫*(代"酸")铵沉淀,透析,定量等进一步处理得到纯化羊抗小鼠IgG抗体,此纯化抗体可以用于标记,免疫沉淀,ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高,本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体,以小鼠IgG结合在树脂上,吸附全部有活性的抗体,这样得到的抗体纯度更高,当然,成本也更高。
总RNA提取试剂盒哪里买关键词:百奥莱博,XH011,总RNA提取试剂盒
·非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)
编号:XH020
规格:10ml/100ml
非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液,或者RNAlocker。实际功能是相同的。
储存条件:15~25℃,有效期2年。。低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点
1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因RNAwait能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,RNAwait能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标
37℃ 一天(保存三天的样品RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期
操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是:量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织,而直接根据目测结果加入RNAwait量,以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块,体积为125mm3=125µl,故应当加入1.25ml的RNAwait液。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,较小的组织直接取下,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存,较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)则可以直接浸入RNAwait。
4. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间(请看技术指标),如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要弃掉保护液。
注意事项:
1.组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2.冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3.保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复温到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
总RNA提取试剂盒哪里买关键词:百奥莱博,XH011,总RNA提取试剂盒
·载体两性电解质PH3.5-10
编号:XH069
规格:12ml
别名:两性电解质两性电解质载体(ph3.5-10):Ampholyte solution、Ampholine。
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号:XH014
规格:100T/400T
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA片段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA 时,先离心沉淀细胞,每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞
问:请问大家提取酵母的总RNA都用什么方法?有好用的试剂盒吗?酵母总RNA提取应该注意什么?答:使用热酚法抽提酵母RNA,很好用,至今没有失败过。(1) 将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30℃过夜旋转培养。(2) 稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。(3) OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。(4) 将细胞悬浮于400μl AE缓冲液(50mM Sodium Acetate,10mM EDTA 调整pH值至5.2
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