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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
T4 RNA Ligase 2(truncated)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
2000U/盒
产品及特点:
T4 RNA 连接酶2(截短型),又称T4 RNL2截短型,可特异性地将DNA 或RNA 的预腺苷酰化 5´末端连接到 RNA 3´末端。该酶连接时不需要 ATP ,但需要预腺苷酰化底物。该酶的表达来自 E. coli质粒,该质粒编码T4 RNA连接酶 2 基因的前249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2不同,T4 RNL2截短型不能将底物的 5´末端腺苷酰化,因此无法将RNA 或DNA的 5´ 磷酸末端连接到 RNA 3´ 端。该酶,可用于microRNA克隆中接头连接的优化,因为此酶只能利用腺苷酰化的引物,因此,可以降低连接背景。其结构式如下图:
1. 将 5 预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到任何 RNA 3 末端
2. 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 克隆文库构建
3. 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异 cDNA 文库构建
4. 无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
T4 RNA 连接酶 2(截短型 )-T4 RNA Ligase 2(truncated)反应条件
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ,10 mMMgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
随酶提供试剂
单位定义
200 单位指 10 μl 反应体系中,25℃ 条件下,1 小时将 80% 的 31-mer RNA连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [通用 miRNA 克隆接头] 所需的酶量。5´-FAM- rArGrUrCrGrUrArGrCrCrUrUrUrArUrCrCrGrArGrArUrUrCrArGrCrArArUrA-3´5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´
Buffer成分
10 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,0.1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50%Glycerol,pH 7.5 @ 25℃
T4 RNA 连接酶 2(截短型 )热失活
65℃ 加热 20 分钟。粪便RNA提取试剂盒
R6828-00 Stool RNA Kit(5)
R6828-01 Stool RNA Kit(50)
R6828-02 Stool RNA Kit(200)
mRNA 提取试剂盒
R6842-00 mRNA Kit(5)
R6842-01 mRNA Kit(50)
R6842-02 mRNA Kit(200)
植物DNA\RNA 共提取试剂盒
R6733-00 Plant DNA\RNA Kit(5)
R6733-01 Plant DNA\RNA Kit(50)
R6733-02 Plant DNA\RNA Kit(200)
DNARNA蛋白质共提取试剂盒
R6734-00 DNARNAProtein Kit(5)
R6734-01 DNARNAProtein Kit(50)
R6734-02 DNARNAProtein Kit(200)
96孔板RNA 提取试剂盒
R1034-00 EZ-96 total RNA Kit(1x96)
R1034-01 EZ-96 total RNA Kit(4x96)
R1034-02 EZ-96 total RNA Kit(12x96)
96孔板hp 总 RNA 提取试剂盒
R6813-00 EZ-96 hp total RNA Kit(1x96)
R6813-01 EZ-96 hp total RNA Kit(4x96)
R6813-02 EZ-96 hp total RNA Kit(12x96)
96孔板hp 总 RNA 提取试剂盒
R6935-00 EZ-96 total RNA Kit II(1x96)
R6935-01 EZ-96 total RNA Kit II(4x96)
R6935-02 EZ-96 total RNA Kit II(12x96)
96孔板石蜡包埋组织RNA 提取试剂盒
R6953-00 EZ-96 FFPE RNA Kit(1x96)
R6953-01 EZ-96 FFPE RNA Kit(4x96)
R6953-02 EZ-96 FFPE RNA Kit(12x96)
96孔板DNARNA蛋白质共提取试剂盒
R6732-00 EZ-96 DNARNA Kit(1x96)
R6732-01 EZ-96 DNARNA Kit(4x96)
R6732-02 EZ-96 DNARNA Kit(12x96)
SQ DNA RNA 蛋白质共提取试剂盒
R8042-00 SQ DNA RNA protein Kit(20)
R8042-01 SQ DNA RNA protein Kit(50)
R8042-02 SQ DNA RNA protein Kit(100)
R8042-03 SQ DNA RNA protein Kit(200)
R8042-04 SQ DNA RNA protein Kit(500)
Taq DNA Polymerase(500U)
Taq DNA Polymerase(1000U)
Taq DNA Polymerase(5000U)
Taq DNA Polymerase(10000U)
2 X Taq MasterMixture(5x1ml)不含染料
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文献和实验使RNA的 3′- OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6. 5. 1. 3.是 J. Hurwitz等( 1972)从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的,与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理,首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体,复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键,它与 RNA的 3′- OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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