- ¥590
- Ybscience
- 中国/上海
- YB120505-500
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Dam Methyltransferase
- 库存：
大量
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
500U/盒
产品及特点：
Dam甲基转移酶能对序列5...GATC...33...CTAG...5中的腺嘌呤（N6）进行甲基化。
活性单位定义
1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μg λDNA不被Mbol限制性内切酶切割所需要的酶量。
Dam 甲基转移酶-Dam Methyltransferase反应条件
1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM [50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ，10mM EDTA，5 mM ]。加入 80 μM SAM (随酶提供) 。37℃温育。
Buffer成分
储存Buffer:50 mM KCl，50 mM Tris-HCl（pH7.5），10 mM EDTA，1mM DTT，200μg/ml BSA和50%甘油。贮存于-20℃。0.5M DTT 10ml
10% SDS 50ml
TEMED 5ml
1M Tris-HCl,pH6.8 50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8 100ml
Western转膜缓冲液 （20x） 100ml
Western一/二抗稀释液 100ml
Western封闭液(BSA型） 100ml
Western洗涤液 250ml
Western一抗二抗去除液 250ml
BCIP工作液 50mg/ml 100ul
NBT工作液 50mg/ml 100ul
10% Sodium Azide (叠氮钠) 100ml
Protease Inhibitor A(广谱性) 1ml
Protease Inhibitor B(适用于细菌) 1ml
Protease Inhibitor C(适用于哺乳动物) 1ml
Protease Inhibitor D(适用于真菌) 1ml
Protease Inhibitor E(适用于哺乳动物) 1ml
Phosphatase Inhibitor M(广谱性) 1ml
Lysozyme/溶菌酶(>20KU/mg)10mg/ml 1ml
Lysozyme/溶菌酶 50mg/ml 5ml
RNase A (10mg/ml) 1ml
RNase A (100mg/ml) 0.5ml
Proteinase K (20mg/ml) 0.2ml
Proteinase K (20mg/ml) 1ml
DEPC水(DNase、RNase free) 100ml
DEPC水(DNase、RNase free) 500ml
RNase Inhibitor 2000U
TE pH 8.0 100ml
3M NaAc pH5.2 100ml
1M MgCl2溶液 100ml
RNA上样缓冲液（6×） 120ul
DNA上样缓冲液(6×Ⅳ) 1ml
Zoman-Green (EB升级换代产品) 1ml
EB/溴化乙锭(10mg/ml) 1ml
TAE电泳缓冲液(50×) 100ml
TAE电泳缓冲液(50×) 250ml
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文献和实验Dam (GmATC)、Dcm (CmCWGG) 和 CpG (mCG) 甲基化 收藏 DNA甲基转移酶(MTases)普遍存在于原核和真核生物中，能将S-腺苷甲硫氨酸上的甲基转移到腺嘌呤或者是胞嘧啶上。当使用限制性内切酶消化DNA时，要考虑是否有甲基化的问题，这是因为如果识别序列中某个特定碱基被甲基化后，切割就会被完全或者不完全阻断。 原核生物甲基化 在原核生物中，DNA甲基化酶作为限制修饰系统的一个组成部分广泛存在
DamIP: Using Mutant DNA Adenine Methyltransferase to Study DNA‐Protein Interactions In Vivo
. Horton, J.R., Liebert, K., Hattman, S., Jeltsch, A., and Cheng, X. 2005. Transition from nonspecific to specific DNA interactions along the substrate‐recognition pathway of dam methyltransferase. Cell 121:349
【求助】请教关于xbaI酶切位点甲基化的问题（看了这么多帖子，都好象没分析到位啊）
2012hunanjob 在xbaI酶切位点上：T^CTAGA碱基对应的是AGATC^T，因为质粒是双链，所以在质粒的xbaI酶切位点上中间肯定有GATC，所以说：我觉得理论上只要是dam+细菌提出来的质粒，xbaI酶切位点都受甲基化影响而切不开.但是我见过别人也是用dam+菌扩增过质粒，用xbaI也可以切开它的酶切位点~~~所以我就迷糊了，请各位大侠们多多指点，小弟在此感激不尽了~~~ 2012hunanjob 顶，有没有
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