- ￥9416
- Merck
- DUO92008-100RXN
- DUO92008-100RXN
- 2025年08月25日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Duolink In Situ 红色检测试剂
- 库存：
2
- 供应商：
研卉生物
- 规格：
100RXN
Duolink In Situ 红色检测试剂
别名:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
技术
proximity ligation assay: suitable
荧光
λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)
适用性
suitable for fluorescence
运输
dry ice
储存温度
−20°C
可实现内源性检测蛋白质相互作用、翻译后修饰和在固定细胞和组织样本的单分子水平表达蛋白质水平。
为了完整地操作Duolink® PLA 原位 实验，您将需要两种可识别两个目的表位的初级抗体 (PLA, IHC, ICC 或 验证的IF) 。其他必要的试剂包括一对来自不同种类的PLA探针(一正一负)、检测试剂、洗涤缓冲液和封片剂。请注意，初级抗体需与Duolink® PLA探针来自相同物种。使用标准的免疫荧光检测设备进行分析。
特异性
红色荧光检测试剂常与Texas Red® 滤光片联用。
应用提示
两种初级抗体需来源于不同物种。在标准免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)或免疫细胞化学(ICC)试验中检测您的初级抗体(IgG类、单克隆或多克隆)，以确定最佳的固定、封闭和效价条件。Duolink® 原位 试剂适用于固定细胞、涂片细胞、载玻片细胞、福尔马林固定细胞、石蜡包埋(FFPE)或组织(新鲜或冷冻)。无最低细胞数量要求。
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特异性
红色荧光检测通常是采用Texas Red®滤光片。
应用说明
需要采用来自不同物种的两种一抗。在标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）检测中测试您的一抗（IgG类，单克隆或多克隆），以确定最佳的固定、封闭和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定的细胞、离心涂片细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定或石蜡包埋（FFPE）的组织（新鲜或冷冻）。无最小细胞数量要求。
特点和优势
- 无需过量表达或基因操作
- 高特异性（更少的假阳性）
- 滚环扩增带来的单分子灵敏度
- 可实现相对定量
- 无需特殊仪器
- 比FRET更快捷简单
- 与co-IP相较有更好的准确度
- 随时可发表的结果
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文献和实验荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
实验原理荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸
原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应（in situ RT-PCR）操作规程
s ，共 26 次循环； （ 3 ）扩增结束后，在 80 ℃烤 15min ～ 30min 。 3 ）原位杂交： （ 1 ）杂交前标本 95 ℃加热 3min ； （ 2 ）加上杂交液，湿盒内 50 ℃过夜； 杂交液组成： 25 ％硫酸葡聚糖， 2×SSC ， 50 ％甲酰胺， 0.33mg/ml 变性的鲑鱼精子 DNA ， 每 0 ． 5mL 杂交液内含生物素标记探针 1ng 。 （ 3 ）扩增的β - 肌动蛋白和 IL-6 用 DAKO 检测试剂盒 K600
次循环； （3）扩增结束后，在80℃烤15min～30min。 3、原位杂交： （1）杂交前标本95℃加热3min； （2）加上杂交液，湿盒内50℃过夜；杂交液组成：25％硫酸葡聚糖，2×SSC，50％甲酰胺，0.33mg/ml变性的鲑鱼精子DNA， 每0．5mL杂交液内含生物素标记探针1ng。 （3）扩增的β-肌动蛋白和IL-6用DAKO检测试剂盒K600(链霉卵白素，生物素标记的碱性磷酸酶和硝基四氮唑蓝)检测。阳性反应呈紫色。
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