Oct-4免疫荧光试剂盒(IF)说明书

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名称：Oct-4免疫荧光试剂盒(IF)说明书
编号：KFS019
产地：国产|进口
规格：50T
品牌：百奥莱博
本试剂盒可用于免疫荧光方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本Oct-4抗原的分布。本试剂盒适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞爬片等。

检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。

在超过有效期的试剂盒中一种或多种试剂的活性可能降低，因此不得使用过期的试剂盒，不同批号间试剂盒也不能交叉混用。

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·一氧化*(代"氮")检测试剂盒(荧光探针法)
编号：KFS313
规格：100T
本荧光探针适合于检测细胞内的一氧化*(代"氮")水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常至少可以检测100 个样品。

DAF-FM DA 即3-Amino,4-aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate ， 也称DAF-FM diacetate 或4- Amino,5- aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate。DAF-FM DA 是最新一代用于一氧化*(代"氮")定量检测的荧光探针，比以前比较常用的一氧化*(代"氮")荧光检测探针DAF-2 diacetate 有多方面的改进。首先，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，最后和一氧化*(代"氮")反应形成的荧光产物受pH 值的影响小，在pH 值大于5.5 时不受pH 值的影响。其次，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者产生的荧光更加稳定，不容易淬灭，这样更加便于检测。另外，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者对一氧化*(代"氮")的检测灵敏度更高，相同条件下检测灵敏度可以提高接近2 倍，最低检测浓度可以达到3nM。

DAF-FM DA 可以穿过细胞膜(cell-permeable)，进入细胞后可以被细胞内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM 。DAF-FM 本身仅有很弱的荧光，但在和一氧化*(代"氮")反应后可以产生强烈荧光，激发波长为495nm，发射波长为515nm。DAF-FM DA 检测一氧化*(代"氮")的机制可以参考上图。任何可以检测fluorescein 的仪器，包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。右图为DAF-FM 在不同浓度一氧化*(代"氮")存在时的发射荧光扫描图谱(fluorescence emissionspectra)。DAF-FM DA 的分子量为496.4，分子式为C25H18F2N2O7，HPLC 分析纯度大于98%。本DAF-FM DA 为溶解于DMSO的淡黄色溶液，浓度为5mM。


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·Caspase 9荧光法检测试剂盒(AFC)
编号：KFS207
英文名称：Caspase-9 Fluorescence Metric Assay
规格：20T|50T|100T
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-9 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-9 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-9 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-9 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。Caspase-9 荧光检测试剂盒就是将Caspase-9 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-9 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-9 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-9 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-9 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3～5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100～200μg 蛋白的要求，因为Caspase-9 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。


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