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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
Box 1,-70°C储存; Box 2,-20°C储存。
- 英文名:
Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit
- 库存:
充足
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技有限公司
- 规格:
12 rxns/24 rxns/96 rxns
| 规格: | 12 rxns | 产品价格: | ¥5000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 24 rxns | 产品价格: | ¥9000.0 |
| 规格: | 96 rxns | 产品价格: | ¥24000.0 |
Single Cell Full Length mRNA-Amplification Kit

第一链cDNA合成, 全长cDNA扩增,产物可用于基因表达差异;融合表达,可变剪切分析

模板起始量低:单个细胞或10pg Total RNA即可作为起始模板,进行高效扩增
扩增灵敏度高:使用LNA技术及精心优化的反应体系,提高低表达基因的检出量
产物完整性好:通过双端引物扩增全长cDNA,获得全转录组信息,避免了5'和3'偏好性

单个293T细胞和10 pg Total RNA分别扩增18个循环,取1 µl纯化后的cDNA扩增产物使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行检测,扩增产物分布于400-10000 bp,文库的peak位于2000 bp 左右;无模板阴性对照无产物。
Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit能以1-500个细胞或10 pg-10 ng总RNA为模板,以Oligo(dT) VN Primer 为逆转录引物进行cDNA的合成,并且利用逆转录酶Sc Reverse Transcriptase的Template-switching活性在cDNA的3’端添加一段接头序列,通过该接头序列进行后续PCR扩增以获得全长cDNA扩增产物。有效避免了cDNA合成过程中的3’偏好性和rRNA的污染,对获得的全长cDNA扩增产物进行测序分析可以得到基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息。
Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit ,兼容样品体积可控制为2.5 μl。一般情况下,一个反应可以产生2-20 ng的cDNA扩增产物。



Box 1,-70°C储存;
Box 2,-20°C储存。
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文献和实验Single-Cell mRNA Library Analysis by Northern Blot Hybridization
The debut of RNA-polymerase cycling reaction (RNA-PCR) has promised to provide linear amplification of a reproducible mRNA library from as few as 20 single cells (1 ). By incorporating a RNA promoter element during the synthesis of double
of containing most of the necessary reagents pre-packaged in RNase-free quality (e.g. polyATtract from Promega or Oligotex mRNA kit from Qiagen work well for Neurospora, Table 1)。 Depending on the kit size, this allows isolation of poly(A)-RNA from 0.25 to 5 mg
Detection of mRNA Expression and Alternative Splicing in a Single Cell
We have developed a method to detect mRNA expression in a single cell without isolating RNA from the cell (1 ). The method includes the following manipulations:detach cells, pick a single cell, destroy the cell by heating, reverse-transcribe
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