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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输和-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
miRNAON
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
1.5 mL/10 mL盒
本产品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳 上样液,含有RNase-free的去离子甲酰胺、 RNase-free的EDTA和RNase-free的染料 等。它具有下列特点:
1. 即开即用,不需要制备RNase-free的 各种溶液。
2. 使用简单,电泳时,先将miRNA样品 与本上样液1:5混合,70℃加热处理 2-3分钟后,0℃冷却即可直接上样。
3. 染料分子小,不会干扰miRNA的染 色。
4. 跟本公司的一站式miRNA 尿素-PAGE 电泳套装兼容。
5. 还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。
miRNA尿素-PAGE上样液-miRNAON低温运输和-20℃保存,有效期一年。D6294-02 MicroElute Gel Extracion Kit (200)
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒,因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外,绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 (1)配制15%的尿素变性PAGE胶,可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液,60V预跑30min。 (2)将样品与RNA loading buffer按比例混合,70℃预热5min,立即放置冰上。 (3)上样前,用缓冲液冲洗点样孔,防止点样孔中的杂质影响电泳。 (4)点样时,使样品均匀铺在点样孔底部
或northern时,你必须验证分析只检测目的miRNA,而不是其它成员。我们在玉米(Zea)RNA载体背景中加入合成的成熟miRNA(IDT)来验证。 就northern来说,每个miRNA家族成员的合成miRNA在含有8M尿素的15% PAGE胶上进行。优化杂交温度,让LNA探针只与目的miRNA结合,而不与其它成员结合。一旦利用加标策略建立了适当的northern杂交条件,就能应用于实验样品。 3. 原位杂交:我们也利用Exiqon的DIG标记的miRCURY LNA
为15%的PAGE(含7 M 尿素)上电泳(用1XTEB 缓冲液) , 最后用0.5ug/mL 的EB 溶液染色。我们这边不用EB染色,但是EB的灵敏度还是很高的,如果EB不行,其他的也都够呛 Q8、PCR寡核苷酸样品被溴酚蓝混合了,如何分离? A8、跑个电泳切后回收一下试试 最后再讲一下,寡核苷酸在引物设计实验中也有着不可忽视的作用,使用合适的寡核苷酸可从三方面考虑:1)估测即将出现的核酸双链稳定性;2)遵从引物选择通用准则;3)根据氨基酸序列design
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