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- 百奥莱博
- 北京
- QN1108-QFT
- 2025年07月12日
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长期
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SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)
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702
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北京百奥莱博科技有限公司
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名称：2×蛋白上样缓冲液(含DTT)厂家直销
规格：10ml
品牌：百奥莱博
英文名：SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)
产地：国产|进口
编号：QN1108
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，*酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位)，电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂，
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文献和实验待用。沉淀重悬于 100 微升 1×SDS 蛋白上样缓冲液中。取 10 微升上清加 10 微升 2×SDS 上样缓冲液，上清和沉淀分别进行 SDS-PAGE，分析溶解程度。5. 稀释透析复性：每毫升上清缓慢加入 9 毫升 6M 尿素的复性液中。装入经 10 mM NaOH 和 1.0 mM EDTA 煮沸 30 分钟，蒸馏水洗涤干净的透析袋中。在 4℃ 10 倍以上体积含有 2M 尿素的复性液中透析 5 个小时。6. 取出透析袋，再放入 4℃ 10 倍以上体积的复性液中透析过夜。7. 取出透析
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
/ LNaCI (2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF ). (3)10 mg / mL 溶菌酶. (4)脱氧胆酸. (5)1 mg / mL DNase I. 2 )超声破碎法 ( 1 ) TE 缓冲液. ( 2 ) 2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液： 100 mmol / L Tris-HCI ( pH 8 . 0 ) 100 mmol / L DTT 4 %SDS 0.2 % 溴酚
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