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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,室温保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
DEAE-Sephadex A-50
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
25 g盒
DEAE葡聚糖凝胶 A-50产品及特点:
颗粒大小: 干粉4 0 - 1 2 0 μ m ; 最高流速: 4 5 c m / h ; 小蛋白以及巨大分子(MW:>20000);广泛用于蛋白质、多肽及生物碱的分离。
常温运输,室温保存,有效期一年。
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文献和实验DEAE-葡聚糖介导的转染,其原理还不清楚,可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核,此法只适合暂时转染实验,转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与DNA/DEAE-葡聚糖混合液接触时间的长短很有关系,可采用较高浓度的DEAE-葡聚糖(1g/L)作用较短时间(30分钟-1.5小时),又可用较低浓度(250g/L)的DEAE-葡聚糖作用较长时间(8小时)。 方法如下: 1. 接种鼠L成纤维细胞浓度为5×105CO2 /孔/皿生长2~3天,当达50%板底面积可用。
1. 接种鼠L成纤维细胞浓度为5×105CO2 /孔/皿生长2~3天,当达50%板底面积可用。 2. 乙醇沉淀的4μg的PSV2-neo质粒 DNA,空气干燥后溶于40μL的TE中,或取供体DNA。 3. 用10ml 1×PBS 、4mL、10%富合生长因子血清的DMEM洗板(皿)。 4. 在80μl热的10g/L DEAE-葡聚糖中缓慢加入DNA,取120μL DNA/DEAE-葡聚糖加到每孔(皿)细胞中,使其分布均匀轻轻转动直到显示均匀
G-25 (Sephadex-G-25) 【 实验操作 】 1.实验凝胶的制备:商品凝胶是干燥的颗粒,使用时需经溶胀处理,称取4克葡聚糖凝胶G—25,加50毫升蒸馏水,搅拌均匀,在室温溶胀6小时,或沸水浴溶胀 2小时,一般采用后一种方法。再用倾泻法除去凝胶上层水及细小颗粒,用蒸馏水反复洗涤几次,再以缓冲溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗涤2—3次,使pH和离子强度达到平衡,最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡,凝胶可保存在缓冲液内。 2.装柱
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