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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Citrate Buffer(100×)
- 库存:
398
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)批发的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)批发
规格:100ml
编号:WE0318
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原,用该修复液修复后阳性染色明显增强,抗原定位理想。
注意事项:
1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
操作步骤:
1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。
2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件:2~8℃
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柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)批发关键词:Citrate Buffer(100×),柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×),WE0318
·土壤基因组提取试剂盒
编号:WE0187
英文名称:Soil Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便,单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA,片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸,通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上,土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer SW | 60ml |
| Buffer SL | 30ml |
| Buffer GLS | 30ml |
| Buffer PR(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇,70%乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本,置于离心管(自备)中,加入1ml Buffer SW,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇,涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来),12000rpm离心1分钟,倒掉上清,用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来),65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5秒),12000rpm离心3分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS,颠倒混匀15-25次,冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意:冰上放置后液体可能会凝结,属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:若一次不能加完溶液,可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置 2-5分钟, 12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
6)基因组DNA模板中微量的残余腐殖酸可能对PCR反应产生不良影响。此时将DNA稀释5-100倍问题通常即可解决。如经稀释后的DNA仍不能有效应用于PCR反应, 请使用腐殖酸清除剂,以获得更高效的清除效果。
储存条件:室温(15~30℃)。
柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)批发关键词:Citrate Buffer(100×),柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×),WE0318
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