相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃,避光保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
cwECL Western Blot Kit
- 库存:
969
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")低背景ECL化学发光检测试剂盒价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:低背景ECL化学发光检测试剂盒价格
编号:WE0307
英文名:cwECL Western Blot Kit
品牌:百奥莱博
规格:50ml|250ml
产地:国产|进口
低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光,可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原,发光信号强
烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
| 组成 | 50ml | 250ml |
| cwECL-A(Luminol) | 25ml | 125ml |
| cwECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将cwECL-A和cwECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 膜上出现棕色或黄色条带 | ||
| 暗室中看到强烈发光 | ||
| 发光信号持续时间过短 | ||
| 信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 |
稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 | |
| 蛋白转移率低 | 优化转移系统 | |
| 高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 封闭不足 | 优化封闭程序 | |
| 封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 | |
| 冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 | |
| 曝光过度 | 减少曝光时间 | |
| 抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 | |
| 蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
| 膜未平衡 | 按照说明书处理膜 | |
| 胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 | |
| 出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) |
系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
| 出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) |
一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
| SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
我公司的低背景ECL化学发光检测试剂盒价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·显影粉
编号:WE0303
英文名称:Developing Powder
规格:20套
·罗丹明标记驴抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0367
英文名称:Donkey Anti-Mouse IgG,Rhod(TRITC)Conjugated
规格:100μl
本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,稳定性好。
荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,激发后呈现明亮的橙红色荧光。与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
·防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)
编号:WE0126
英文名称:Multiplex PCR MasterMix(UNG)
规格:1ml
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸 索即可轻松进行多重PCR反应。
本产品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效 减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。独特的缓冲体系,使多重PCR反 应所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有 助于实现“困难”模板(比如,高GC含量的模板)的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统,可有效去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导 致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成。
本品可有效防止PCR产物的残留污染,适用于防污 染多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
低背景ECL化学发光检测试剂盒价格关键词:cwECL Western Blot Kit,WE0307,低背景ECL化学发光检测试剂盒
BOC-L-异亮*酸 Amberlite 732 13139-16-7
ARB10820 人抗红细胞抗体(RBC)酶免分析 Human anti-red cell antibody ELISA KIT
ARB11222 人细胞角蛋白20(CK-20)含量测试 Human cytokeRatin 20,ck-20 ELISA KIT
ARB13044 小鼠尿素(UreA)免费代测 Mouse urea ELISA KIT
ARB10060 人B细胞生长因子(BCGF)ELISA代测服务 Human b cell growth protein,bcgf ELISA KIT
BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
F040101 牛血清白蛋白偶联克伦特罗 BSA-CLE
H0201 兔血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/500ml/500ml*20
四氮唑蓝 CBZ-L-Pyroglutamic acid 1871-22-3
F030207 HRP标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*HRP
ARB11909 人癌胚铁蛋白(CEF)Elisa分析 Human carcinoembryonic ferritin,cef ELISA KIT
J0302 兔抗猴IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB12641 大鼠游离三碘甲腺原*酸(TT3)血清中含量检测 Rat tt3 ELISA KIT
ARB10200 人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)Elisa分析 Human α-sarcomeric actin,α-sca ELISA KIT
HC0067 PCR八连排管(鼓)
SJ0196 DEAE Sephadex A-50
BL0893 FITC标记羊抗人IgG抗体
SJ0615 Validamycin 井冈霉素
低背景ECL化学发光检测试剂盒价格关键词:cwECL Western Blot Kit,WE0307,低背景ECL化学发光检测试剂盒
·蛋白分子量Marker
编号:WE0280
英文名称:Protein Molecular Weight Marker
规格:100次
本蛋白Marker由8条纯化好的蛋白质组成,其分子量范围是14.4 KD-220 KD(14.4 KD、20 KD、29 KD、35 KD、40 KD、66 KD、90 KD、220 KD),每种蛋白浓度为0.1-0.2 µg,进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳时,染色后可以用来判断蛋白质的分子量。本产品仅适用于SDS-PAGE凝胶电泳考蓝染色,不适用于Western Blot检测。
注意事项:
1、仅适用于SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色,推荐使用8%-12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶。
2、不推荐用于Native-PAGE。
3、不适用于Western Blot检测。
4、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。
操作步骤:
1、加样前在室温或者37℃-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本产品推荐上样量为5μl,可根据凝胶的厚度和浓度大小调整。
实验图例:
12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后,经ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂(#WE0290)染色的结果。
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购低背景ECL化学发光检测试剂盒价格。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Ecl 显色原理:鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,在HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光来。 试验步骤: 1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。 2)将混合物覆盖在膜表面,1-2分钟,摇晃使均匀。 3)用保鲜膜把膜包起来,放入夹板中。 4)在暗室中将X光片,覆盖在膜的上面,夹好夹子,曝光1min。 5)显影、定影。 6)根据结果调整曝光时间和曝光区域,得到
蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
过夜具体多长时间算合适,其实没有硬性规定; 二抗孵育的时间不宜过长,一般是室温下摇床孵育 1~2 小时,抗体孵育完成后要清洗干净,特别是二抗孵育完成后,否则可能导致显影结果出现高背景。 6、发光液配置 大部分实验室使用的 ECL 发光液,A 液和 B 液按照 1:1 的比例配置; 发光液要求现用现配,每次根据使用量合理配置用液量; 发光液配置时间过长同样会引起发光效果不好,背景脏或者漆黑一片。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










