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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
MagBeads Blood DNA Extraction Kit
- 库存:
302
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖
英文名:MagBeads Blood DNA Extraction Kit
品牌:百奥莱博
编号:WE0208
产地:国产|进口
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的血液DNA提取方法,适用于从新鲜或冷冻抗凝血(柠檬酸盐、EDTA、肝素处理过的血液样品)中提取血液DNA。在离液盐存在时,DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。经两步漂洗以及一步快速漂洗(MW3的快速漂洗对于提高DNA纯度有很大帮助)后,高纯度的DNA被洗脱于EB或去离子水中。DNA得率与样品的类型,储存条件、时间以及样品中白细胞的含量有很大关系。纯化得到的DNA纯度好(260/280的比值在1.7-1.9之间,260/230的比值大于1.5),完整度高(最高可达50 kb),可用于克隆,定量PCR,芯片测序等下游反应。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer ML | 24ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 80ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 50ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 1ml |
自备仪器及试剂:
1、手动单管操提取:
1)恒温混匀仪
2)2/15ml磁力架
3)异丙醇、无水乙醇
2、手动96孔深孔板提取:
1)恒温混匀仪
2)废液抽吸系统
3)手动连续分液器
4)电动连续分液器
5)手动连续分液器分液管(25ml)
6)96孔深孔板磁力架
7)异丙醇、无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、异丙醇与Magbeads混合物的制备(以制备提取10个样品所需量为例)
1)向合适容量(加入异丙醇和Magbeads后总体积小于离心管容积的2/3)的离心管中加入3.3ml【0.3×(10+1)=3.3】的异丙醇。
注意:如用移液器加入异丙醇,需用移液器将枪头在异丙醇吹吸两次后再缓慢吸取异丙醇。
2)向上一步的离心管中加入220μl【20×(10+1)=220】Magbeads
注意:Magbeads加入前需涡旋振荡20秒使其充分混匀,异丙醇与Magbeads混合物使用前需涡旋振荡20秒钟使其成为均一的溶液。
3)异丙醇与Magbeads混合物使用前需涡旋振荡10秒钟使其成为均一的溶液。
3、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
4、样品应避免反复冻融,否则会导致提取得到的DNA片段较小且提取得率低。
5、次使用前应按试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
6、如Buffer ML中出现沉淀,请在56℃水浴锅中重新溶解,摇匀后即可使用。
7、实验过程中,磁珠在溶液中的充分混匀对于提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪震荡混匀效果有一定差异,实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象,请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率。
操作步骤:
一、手动单管操作:
1、向1.5ml的离心管中加入20μl 蛋白酶K ,之后加入200μl的血液。
注意:
1)冷冻抗凝血液需提前在室温(15~30℃)下放置,融化混匀。
2)如血液体积大于或小于200μl,蛋白酶K 、Buffer ML和异丙醇与磁珠混合物的用量需按比例调整。
2、向离心管中加入200μl Buffer ML,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后,将离心管放于56℃水浴锅中孵育15分钟,期间涡旋震荡混匀2次。
3、将离心管从水浴锅中取出,短暂离心后室温放置5分钟。加入彻底混匀的320μl异丙醇与Magbeads混合物,涡旋震荡混匀5秒钟后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混匀
仪上震荡混匀5分钟或将离心管连续颠倒混匀10分钟。
4、将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
5、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋振荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、重复步骤5。
7、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋振荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
8、重复步骤7。
9、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
注意:如果离心管侧壁上有液珠,可向离心管中加入750μl无水乙醇。盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上),之后彻底弃去无水乙醇。
10、将离心管从磁力架上取下,加入50-200μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟,或将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
11、将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
二、手动96孔板操作:
1、向2ml 96孔深孔板(简称“深孔板”)中加入20μl 蛋白酶K ,之后加入200μl血液,并记录每孔中所加血液名称。
注意:
1)可将蛋白酶K 预先分装于8连管中,每管加入260μl。之后,用8通道移液器将蛋白酶K 分装于96孔深孔板中。
2)血液需加到96孔深孔板的底部,避免血液触碰到孔的上部。
2.向深孔板中用电动连续分液器或8通道移液器加入200μl Buffer ML。
3.将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟,盖上硅胶盖后将深孔板放于56℃水浴锅中孵育15分钟,之后再将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟。
4、将深孔板从恒温混匀仪上取下,用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入彻底混匀的320μl Magbeads与异丙醇混合物。盖上硅胶盖后,立即将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟。
5、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
注意:用废液抽吸系统去除溶液时需将真空泵调节至较小的负压力值,使溶液以一个合适的速度被吸走,速度过快会造成磁珠的丢失。
6、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
7、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
8、重复步骤6-7。
9、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
10、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
11、重复步骤9-10。
12、用手动连续分液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇,之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
13、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
14、保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
15、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入100-200μl Buffer EB,之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热,洗脱液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
16、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟,用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。
储存条件:室温(15~30℃)
除磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)
编号:WE0289
英文名称:SDS-PAGE Loading Buffer(non-Reducing,5×)
规格:5×2ml
SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)是以*酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于非还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。
注意事项:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本品不含还原剂如巯基乙醇或DTT。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后,以取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内。进行常规电泳。
储存条件:-20℃
·抗GAPDH单克隆抗体
编号:WE0356
英文名称:Anti GAPDH Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达,常用于Western Blot检测中校正系统的内参。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:纯化的GAPDH蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)
应用种属:人、小鼠、大鼠、兔、猪,鸡、拟南芥
磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖关键词:MagBeads Blood DNA Extraction Kit,WE0208,磁珠法血液DNA提取试剂盒
ARB11063 人转化生长因子受体β1(TGF-β1)Elisa方法检测 Human transforming growth factor-β,tgf-β
碘化丙啶 DAB 25535-16-4
F030221 HRP标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*HRP
BTN130541 E-64蛋白酶抑制剂溶液 E-64 Proteinase Inhibitor Solution
BL0932 RBITC标记兔抗山羊IgG抗体
ARB12219 大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)酶免分析 Rat platelet-derived growth factor,pdgf ELISA KIT
ARB12102 大鼠甘油三酯(TG)血清中含量检测 Rat triglyceride,tg ELISA KIT
PY01-162 磷酸二**(无水) 500克
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ARB13165 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)含量测试 Mouse heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
F030308 胶体金标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*GOLD
7585-39-9 β-环糊精
β-丙*酸乙酯盐*(代"酸")盐 Fast Black K Salt 4244-84-2
A6806-11 胎牛血清 100ml|500ml
磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖关键词:MagBeads Blood DNA Extraction Kit,WE0208,磁珠法血液DNA提取试剂盒
L-赖*酸L-谷*酸盐 Heparin Sepharose 6FF 5408-52-6
PY08-014 碱性琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于霍乱弧菌的选择性分离培养
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茜素蓝S N-Acetyl-D-tryptophan 66675-89-6
BL1158 无内毒素质粒小量提取试剂盒
BTN60805 中草药DNAOUT Herbal DNAOUT
BTN70906 NTP溶液,10mM NTP Solution,10 mM
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购磁珠法血液DNA提取试剂盒哪里卖。
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