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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
NuPure DNA/RNA Extraction Kit
- 库存:
839
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖DNA/RNA提取试剂盒价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:DNA/RNA提取试剂盒价格
英文名:NuPure DNA/RNA Extraction Kit
品牌:百奥莱博
规格:50次
本试剂盒可用于从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。由于不需要将样本分成两份用于不同的纯化步骤,该试剂盒可最大限度的回收DNA和RNA。纯化的DNA和RNA被单独洗脱并可直接用于各种下游实验。本试剂盒中不包含*酚和*仿等有毒物质,无需乙醇沉淀,操作简单、快捷。基因组DNA可用于PCR、Real-time PCR、Southern Blot、 Dot Blot、 比较基因组杂交(CGH)、 基因分析和SNP分析; 总RNA可用于RT-PCR、 Real-time RT-PCR、cDNA的合成、Northern Blot、Dot Blot等分析。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 100个 |
自备试剂:β-巯基乙醇(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(用无RNase的水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用RNase-Free Water。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响提取DNA和RNA的质量。样品在Buffer RL中,可于-70℃保存一个月。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer RW2、Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请于56℃水浴重新溶解。
6、所有离心步骤均使用台式离心机,室温下进行。
操作步骤:
1、材料处理
① 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(最大提取量为107个细胞), 收集细胞,弃尽培养液,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),反复吹打使其充分裂解。
注意:一定要弃尽培养液,否则影响裂解和后续的核酸纯化步骤。
② 取不大于30 mg的动物组织,液氮研磨成细粉末,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),或直接加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),匀浆处理。
注意:匀浆要充分,否则影响RNA产量。
2、将上步所得溶液12000rpm(~~13400×g)离心3-5分钟,小心的将上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心30-60 秒,收集滤液。将吸附柱DM放在一个新的收集管中,室温或4℃放置,待提DNA。
注意:确保吸附柱DM上没有液体残留,如果有必要可以重复离心,直至所有的液体通过吸附柱DM的膜。
总RNA提取
3、向步骤2所得滤液中加入1倍体积的70%乙醇(无RNase的水配制),混匀。
4、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱RM中,若一次不能全部加完溶液,可分次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入700μl Buffer RW1, 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
6、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒, 倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
7、重复步骤6。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱RM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:此步骤目的是去除吸附柱RM中残余的乙醇,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱RM置于一个新的无RNase1.5ml离心管中,向吸附柱RM的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
① RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤9。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤9。
基因组DNA提取
10、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放收集管中。
11、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇), 12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放回收集管中。
12、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱DM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱DM中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱DM置于一个新的无RNase 1.5ml离心管中,向吸附柱DM的中间部位加入100μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
① Buffer GE的体积不应小于100μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高DNA的产量,将100μl新的Buffer GE加至吸附柱上,重复步骤13。
③ 如果要提高DNA浓度,可以将步骤15所得的DNA洗脱液重新加至吸附柱上,重复步骤13。
储存条件:室温(15~30℃)
更多有关DNA/RNA提取试剂盒价格的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·esB Taq DNA Polymerase
编号:WE0103
英文名称:BesB Taq DNA Polymerase
规格:500U|2500U
Es Taq DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性。在普通的PCR条件下,与Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能,兼具有Taq DNA Polymerase的高扩增效率和Pfu DNA Polymerase的高保真性。使用本品扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规的PCR反应和对保真性有要求的基因克隆等反应。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500U |
| Es Taq DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| Es Taq DNA Polymerase,5 U/μl | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
DNA/RNA提取试剂盒价格关键词:WE0203,DNA/RNA提取试剂盒,NuPure DNA/RNA Extraction Kit
·cfDNA文库定量试剂盒(Illumina平台)
编号:WE0234
英文名称:NGS Library Quantification Kit for Illumina
规格:1ml|5ml
本产品是采用染料法(SYBR Green I)对NGS建库后的产物进行实时荧光定量PCR(qPCR)。试剂盒提供了qPCR过程所需的反应混合液,DNA引物混合物、标准品以及样品稀释液,试剂体系完整,操作简单方便。反应混合物中所含的荧光染料SYBR Green I 可以与所有的双链DNA结合。本试剂盒使用的是一种经化学修饰的全新高效热启动聚合酶,酶的激活需在95℃下孵育10 min。该产品特异性强、扩增效率高,能够对构建的文库浓度进行快速准确的定量。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器: Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器: ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器: ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
DNA/RNA提取试剂盒价格关键词:WE0203,DNA/RNA提取试剂盒,NuPure DNA/RNA Extraction Kit
F030227 HRP标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*HRP
F020208 山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG
双吡唑酮 PEP-K 7477-67-0
ARB13213 小鼠凋亡诱导因子(AIF)免费代测 Mouse apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
ARB11341 human胎盘碱性磷酸酶(PLAP)尿液中含量检测 Human placental alkaline pkosphatase,plap ELISA KIT
BL1149 10×DNA上样缓冲液
DP302 细菌基因组DNA提取试剂盒
ARB10067 人B淋巴细胞刺激因子(Blys)受体elisa检测说明书 Human b lymphocyte stimulator,blys ELISA KIT
329-98-6 PMSF *甲基黄酰*
320-67-2 5-氮杂胞苷 5-Azacytidine
ARB10204 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa检测操作说明书 Human β2-glycoprotein 1 antibody iga/g/m,β2-gp1 iga/g/m ELISA KIT
ARB11900 人磷酸苷油酸脱*酶(GADPH)Elisa分析
ARB10689 人肌抑素(MSTN)代做ELISA实验 Human myostatin,mstn ELISA KIT
我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购DNA/RNA提取试剂盒价格。
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
2013年诺贝尔生理或医学奖落花落“基础研究”,无疑给了大家一剂兴奋:在最基础的研究上,坚持下去;在小实验室里,自由探索。丁香通试用中心为助力科研,特推出申请试用装,送丁当的活动。 活动时间:2013.10.9-10.30 活动形式:跟帖附上申请的试用装,每申请一件,送2个丁当。 格式:我申请:动物组织总RNA提取试剂盒 重点推荐:5款PCR、RNA提取试剂盒 产品特点简介: 1. 动物组织总RNA提取试剂盒:去除DNA污染;无需担心RNA降解;高纯度;高得率
本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。RNAiso Reagent具有很强的广谱性,可以适用于各种样品的总RNA提取,提取过程方便快速,整个操作在一小时内便可以完成。经本制品提取的总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组 DNA,提取的RNA可以直接
。3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液RLT,主要成分为异硫氰酸胍,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织(例如玉米的乳白色胚乳)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍使样品产生固化,导致RNA 无法提取,此时可以向我们索取另一种裂解液RLC,将解决该问题。5. 关于DNA 的微量残留:一般说来
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