北京结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)现货

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北京百奥莱博专业生产供应北京结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)现货，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)现货
规格：50次
英文名：TB Typing Kit(HV-3)
品牌：百奥莱博
编号：WE0119
产地：国产|进口
  本试剂盒是以分子流行病学最新研究进展为基础，经工艺优化后形成的人型结核分枝杆菌基因分型产品。本产品利用结核分枝杆菌基因组中可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeats, VNTR)多态性进行基因型分型区分临床菌株，是研究结核分枝杆菌分子流行病学和监测结核病传播状况的有力工具。与现有其它基于VNTR原理的结核分枝杆菌VNTR分型系统相比，这一分型系统对中国流行的菌株具有更强的分辨能力 ，因此特别适合于中国用户的需求。

  通过对各PCR反应引物序列和预混反应液成份进行精心优化，使得本产品具有很强的抗干扰力。与用户自配试剂相比，本产品显著提升了特异条带信号强度，降低了使用粗制模板(煮沸菌液)时非特异条带的出现率，使实验操作更加简便、快捷的同时，提高了检测成功率。本产品的预混反应液化学稳定性良好，能有效抵抗反复冻融(10次)和较长时间(一周)的室温环境，更好地适应了用户检测工作中的灵活性需求。

  本试剂盒是TB基因分型试剂盒VNTR-9(货号WE0118)的配套产品。对VNTR-9试剂盒鉴定为成簇或相同菌株的样本，如有必要，可使用本产品做更精细的进一步分型鉴定。本产品中的3个高分辨率检测位点VNTR3820，VNTR4120和VNTR3232与VNTR-9中的9个检测位点结合使用可将检测的分辨率指数(Hunter-Gaston index，HGI)提升至0.993 。

想要了解更多关于北京结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)现货的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
编号：WE0202
英文名称：RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I)
规格：50次
  本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA，即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA，如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣，香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方，可使细胞中的RNA酶迅速灭活，有效去除多糖多酚对RNA提取的影响，无需*酚、*仿等试剂，同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化，提取的总RNA纯度高，无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
DNase I	1000 U
10×Reaction Buffer	1000μl
Buffer RLS	40ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
过滤柱FS及收集管	50套
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	50个

保存条件：DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存，其它组分室温(15～30℃)。

自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)

产品特点：
1、适用范围广：可从各种植物中提取总RNA，即便是多糖多酚含量丰富的植物也能成功提取。
2、纯度高：彻底去除污染物及下游反应抑制物，提取的RNA适合于多种下游应用。
3、成功提取的样本：水稻叶片、小麦叶片、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、黄豆、花生、马铃薯块茎、松针、银杏叶、杨树叶、冬青叶、月季等样本。

RNA得率：

植物样本(100mg)	总RNA量(μg)
拟南芥荚果	～50
大豆	～55
玉米叶片	～55

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
① 使用无RNase的塑料制品和枪头。
② 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3、Buffer RLS如果产生沉淀，请加热使其溶解后室温放置。
4、Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇，1ml Buffer RLS加20μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
5、第一次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。

操作步骤：
1、匀浆处理：取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末，加入500μl Buffer RLS(使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇)，立即涡旋剧烈震荡混匀。
注意：对于含水量极其丰富的材料，如西瓜果肉，西红柿，梨果肉等，可以适当多加入些材料，最多可增加至200mg；对于富含淀粉的样本或成熟叶片，可适当增加Buffer RLS的用量，最多可增加至700μl。
2、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心2分钟。
3、将上清液转入已装入收集管的过滤柱中，4℃ 12000rpm离心1分钟，小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管(自备)中，枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
4、缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇，混匀(此时可能会出现沉淀)，将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入。4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1，4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、配制DNase I 混合液：取52μl RNase-Free Water，向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl)，混匀， 配制成终体积为80μl的反应液。
7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。
8、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1，4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 4℃ 12000rpm离心1 分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、重复步骤9。
11、4℃ 12000rpm离心2分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes(1.5ml)中，向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50μl RNase-Free Water，室温放置2分钟，4℃ 12000rpm离心1分钟，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
注意：
① RNase-Free Water体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
③ 如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤12。

储存条件：2～8℃。


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BTN80917 一步法96孔板质粒DNAOUT(离心法) One-Step 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
ARB11766 人腺苷酸环化酶1(AC-1)Elisa方法检测 Human adenylyl cyclase 1,ac-1 ELISA KIT
F030628 FITC标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*FITC
ARB10847 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体代做ELISA实验 Human Histone h2a-h2b-dna autoantibody ELISA KIT
L-苏*酸 Oxacillin sodiu*(代"m") salt 72-19-5
7240-90-6 X-gal
ARB13029 小鼠免疫球蛋白G1IgG1)ELISA检测服务 Mouse immunoglobulin g1,igg1 ELISA KIT
ARB13293 小鼠糖化血红蛋白A1c elisa测定使用说明书 Mouse glycated hemoglobin a1c ELISA KIT
ARB11131 人肺癌标志物Elisa定量检测 Human lung cancer marker ELISA KIT
ARB13670 兔主要组织相容性复合体I类(MHCI/RLAI)免费代测 Rabbit major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/rlai ELISA KIT
3,4-二羟基*甲醛 Atrazine 139-85-5
硫代甜菜碱8 BOC-D-Glutamic acid 15178-76-4
79-06-1 丙*(代"烯")酰胺 Acrylamide
放线菌*(代"素")D Furaltadone 50-76-*(代"0")
70024-90-7 人血清白蛋白 Albumin  Human
ARB10098 人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa检测 Human epstein-barr virus igm,ebv igM ELISA KIT
PY02-067  抗生素检定培养基Ⅴ号  250克  
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·2×Babuddy MasterMix(含染料)
编号：WE0110
英文名称：2×Babuddy MasterMix(With Dye)
规格：1ml|5ml
  本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的聚合酶其活性区域融合有一段聚合增强结构域，独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30s/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷，大大缩短了反应时间。
  本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA，尤其在扩增>10 kb的DNA片段时，优势更加明显，所扩增的片段最长可达20 kb。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。
  使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基，可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆，需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。

产品特点：
1、高保真性：保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，普通Pfu的6倍。
2、扩增速度快：其延伸速率为15-30sec/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
3、特别适合于扩增长片段：扩增的片段长度可长达20kb。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×Babuddy MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	20μl反应体系	50μl反应体系	终浓度
2×Babuddy MasterMix	10μl	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Reverse Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Template DNA	适量	适量	<250ng
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl

a．模板：在50μl PCR反应体系中，DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA，λDNA等)1 pg- 10ng，高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
b．引物：引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考，推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件
常规三步法PCR反应：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
退火	45-72℃	10-30 s
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

a．变性：简单模板的预变性温度为98℃，预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板，预变性时间可延长至3分钟。
b．退火：使用本产品时，退火温度设定的基本原则是，当引物长度小于或等于20 nt时，退火温度为引物最低的Tm；当引物长度大于20 nt时，退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时，应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
c．延伸：本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的扩增效率为2-4 kb/min，复杂性低的模板可用4 kb/min，复杂性高的基因组DNA模板，延伸时间则应为2 kb/min，对于一些cDNA模板，延伸时间可增加到1.5 kb/min。
d．循环次数：可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。

当引物的退火温度较高时，建议使用两步法进行PCR扩增：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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