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- HZbscience
- 中国/上海
- HZ120310-1000
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
T7 RNA Polymerase
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
1000 U盒
T7 RNA聚合酶产品及特点：
本酶是噬菌体T7 DNA编码的酶，对T7启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5′→3′的RNA聚合酶活性，以含有T7启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
1. 为 Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2. 制作 RNA 剪接反应（RNA Splicing）的前体。
3. 以帽类似物（Cap analog）为引物，制作Capped mRNA。
T7 RNA聚合酶质量标准
无endodeoxyribonucleases，exodeoxyribonucleases，phosphatasesand ribonucleases污染。SDS-PAGE下呈单一带，纯度>99%。
活性单位定义
1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。酶活性检测反应混合物：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM亚精胺，0.5mM各种NTP，0.6MBq/ml[3H］-ATP和20μg/ml含有相应启动子的序列的质粒DNA。
Buffer成分
储存Buffer:50mM Tris-HCl (pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM ELUGENT 去污剂和50%（v/v）甘油。反应Buffer，5×：200mM Tris-HCl (pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl和10mM亚精胺。
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板（ template）、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关，所以也称转录酶。反应以下式示： n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成，合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由（ 1） DNA与酶的结合
，则可计算其直径约为100A，即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸 ，提示其形状应为椭圆球形。 结构 为什么细菌 的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多，仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明，噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7的RNA聚合酶分子很相似
mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC. Spin briefly to pull
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