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- HZbscience
- 中国/上海
- HZ131235-200
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Klenow Fragment (3´→ 5´ exo-)
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
200U盒
Klenow 片段 (3´→ 5´ exo-)产品及特点：
Klenow 片段（3´→5´exo-）是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物。它保留了DNA 聚合酶活性，但失去了 5´→3´ 外切核酸酶活性。该酶经突变（D424A）去除了其 3´→5´ 的外切核酸酶活性。
具体有下列特点：
1. 用随机引物制备探针
2. 随机引物标记法
3. 合成 cDNA 第二链
4. 诱变反应中第二链的合成
5. 双脱氧法 DNA 序列测定（Sanger 法）
Klenow 片段 (3´→ 5´ exo-)注意事项
Klenow 片段（3´→5´exo -）因去除了 3´→ 5´ 外切酶的活性，故不适宜用于生成平末端的反应。当用于双脱氧法 DNA 序列测定时，建议用 1 unit/5 μl 反应体系。
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文献和实验Buffer/tube and incubate 10' @ 70oC. 6. Add: 2.0ml 10X Klenow Mix +2.0ml 0.125mM dNTPs +0.5ml Klenow Incubate 10' @ 37℃. 7. Analyze 10ml on a gel. To the remainder in each tube, add 40ml Ligation Mix + 1ml T4 DNA Ligase. Incubate overnight @ 15℃
断裂。原位末端标记(in situ end labeling，ISEL)是将掺入到凋亡细胞中的外源性核苷酸，在酶如末端脱氧核苷酸转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase，TDT)、DNA聚合酶I或Klenow大片段等的催化下，与凋亡细胞单股或双股DNA断链相结合，再通过一定的显示系统使之显示出来。比较常用的有两种方法：末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUT
10 X Klenow Buffer 0.5 M Tris 7.5 500 ml 1 M Tris 7.5 0.1 M MgCl2 100 ml 1 M MgCl2 10 mM DTT 100 ml 0.1 M DTT 0.5 mg/ml BSA 50 ml 10 mg/ml BSA 250 ml Q store at -20° in 50 ml aliquotes dNTP Mix
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