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- 2025年07月14日
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4-8度
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1000
- 供应商：
古朵
名称：pDONR201载体，植物系列质粒
系列属性：植物系列质粒
供应商：上海古朵
规格：5μg
质粒类型：Gateway载体；克隆载体
高拷贝/低拷贝：低拷贝
克隆方法：Gateway; BP反应
载体大小：4470 bp
5' 测序引物及序列：pDONR-F: 5'-TCGCGTTAACGCTAGCATGGATCTC-3'
3' 测序引物及序列：pDONR-R: 5'-GTAACATCAGAGATTTTGAGACAC-3'
载体抗性：卡那霉素 / 氯霉素
备注：载体本身含有CCDb致死基因，能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡，必须使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增，用来构建Gateway系统入门载体。pDONR201尽管含有pUC质粒的起始复制点，但是细菌内仍然是低产量质粒。构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2感受态细胞。
质粒载体：植物系列质粒，RNA文库质粒，病毒系列质粒，人源基因质粒，酵母系列质粒，大肠系列质粒，哺乳系列质粒，基因文库质粒，质粒其他系列载体
pDONR201载体，植物系列质粒 订购说明：
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体，所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点，需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆，蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术，您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白，优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白（图5）。 图5 在Gateway
系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
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