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- 2025年07月16日
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古朵
名称：pET-44a（+）大肠杆菌蛋白表达载体，大肠系列质粒
别名：pET44a, pET 44a
供应商：上海古朵
规格：5μg
质粒类型：大肠杆菌蛋白表达
表达水平：高
克隆方法：多克隆位点，限制性内切酶
载体大小：7311 bp
pET-44a（+）大肠杆菌蛋白表达载体，大肠系列质粒图谱：
5' 测序引物序列： T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物序列： ColiDOWN: 5'-TTCACTTCTGAGTTCGGCATG-3'
载体标签：C-HSV, N-His, C-His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK
载体抗性：氨苄
表达宿主菌：BL21（DE3） 、 Rosetta2（DE3）、C43（DE3）
备注：载体同时含有N端及C端His标签； 含有N端Thrombin和EK蛋白酶酶切位点； pET44a,b,c 载体的差异主要是在多克隆位点。
稳定性：瞬时表达
pET-44a（+）大肠杆菌蛋白表达载体，大肠系列质粒
质粒：
质粒是细胞中非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子，是基因工程最常见的运载体。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，大部分的质粒为环状构型，但也存在线形质粒。
古朵生物，专业供应科研实验所需的培养基，抗体，动物血清血浆，标准品对照品，化学试剂，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，微生物，蛋白质，ELISA种属涵盖广，凭借多年行业经验，完善的售后服务，高质量的产品，赢得客户一致好评，欢迎来电咨询与订购！
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文献和实验需求来确定所用的模板质粒。重组质粒载体构建可以经过酶切酶连、无缝克隆、Gateway 克隆等方式将目的片段连接到目标载体上，或者对载体上的一些元件进行改造。改造好的质粒转入大肠杆菌中进行扩增及抽提。 3、质粒抽提的一般操作流程 从培养的大肠杆菌中抽提质粒，一般需要经过大肠杆菌培养、菌液收集、菌体裂解、基因组 DNA 及蛋白沉淀、质粒吸附、质粒漂洗、质粒洗脱、质粒检测、质粒保存等流程。 内容来源：QIAGEN 凯杰
，或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α（+）载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag™硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统，可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价，快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大，因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中，我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α（+）载体的构建，蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应（PCR
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择！（接原原核表达研究者关心的10个问题贴）
表达真核基因的时候，真核基因中的一些密码子对于原核细胞来说可能是稀有密码子，从而导致表达效率和表达水平很低。改造基因是比较麻烦的做法，Rosetta 2系列就是更好的选择——这种携带pRARE2质粒的BL21衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的七种（AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 及CGG）稀有密码子对应的 tRNA，提高外源基因、尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。（已经携带有氯霉素抗性质粒）。 当要表达的蛋白质需要形成二硫键以形成正确的折叠时，可以选择K–12衍生菌
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