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100000
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远慕
名称:pLKO.1-shYAP1#1-Puro载体,RNA文库质粒
系列属性:RNA文库质粒
供应商:上海远慕
规格:5μg
复制子:pUC ori,F1 ori,SV40 ori
终止子:cPPT/CTS , 3
质粒分类:RNA文库质粒;RNA人源质粒;shRNA人源质粒
质粒大小:7084bp
原核抗性:Amp(100μg/ml)
筛选标记:Puro
克隆菌株:Stbl3
培养条件:37℃,LB,有氧
表达宿主:293T等哺乳细胞
诱导方式:无需诱导
5'测序引物:U6-F(ATGGACTATCATATGCTTACCGTA)
3'测序引物:pLKO-R(CTGCACTGTACCCCCCAATC)
pLKO.1-shYAP1#1-Puro载体,RNA文库质粒 订购说明:
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文献和实验在体外将两个或多个来源相同或不相同的 DNA 片段连接成新的重组 DNA 分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA 重组技术的基本程序包括:(1)获得外源 DNA:外源 DNA 是进行 DNA 重组的目的 DNA 片段,一般采用 DNA 聚合酶链式反应 (PCR) 或逆转录-DNA 聚合酶链式反应 (RT-PCR)、基因组文库或 cDNA 文库筛选等方法获得。(2)载体的构建或选择:分子生物学中用的载体是指能在特定宿主细胞中自主复制的 DNA 分子
1、化学合成法 要求:已知目的基因的核苷酸序列或其产物的氨基酸序列。 2、基因组DNA文库(genomic DNA library) 基因组DNA文库:存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。 3、cDNA文库:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA,再复制成双链cDNA片段,与适当载体连接后转入受体菌,即获得cDNA文库(cDNA library)。 (二)克隆载体的选择 常用载体:质粒DNA、噬菌体DNA、病毒DNA 载体的选择标准
相同靶序列的不同限制酶切割; 3)用识别不同靶序列但可产生一致的粘性末端的限制酶切割。 3、特点: 根据上述限制酶的特点,在基因工程和基因诊断中的重要用途: 1) 不论DNA的来源如何,同一种限制酶切割后产生的粘性末端容易重新连接。因此可将不同种属的DNA重组。如人和质粒DNA等。 2) 用于人类基因组的DNA分析,具特定的酶切位点。 3) Gene突变改变酶切位点的消失或新产生将改变酶切片段长度。应用于限制性片段多态性分析。 二、基因运载体及其选择 载体(Vector
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