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参考说明书
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100000
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远慕
名称:pET-11c(+)大肠杆菌质粒载体,大肠系列质粒
质粒名称: pET-11c
其他名称: pET11c
供应商:上海远慕
规格:5μg
质粒大小(bp): 5675 bp
抗性: Ampicillin
质粒类型: 大肠杆菌表达载体
pET-11c(+)大肠杆菌质粒载体,大肠系列质粒图谱:
是否病毒: 非病毒
启动子: T7/lacO
稳转或瞬转: 瞬时表达
组成型或诱导性: 组成型
表达水平: 高
蛋白标签: N-T7
5’测序引物: T7:5′-TAATACGACTCACTATAGGG-3′
其他属性: Approximate size is 5675 bp. Hosts: E.coli. Related vectors: pBR322.
质粒类型:大肠杆菌表达载体
表达水平:高
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体标签:N-T7
大肠杆菌质粒DNA:
大肠杆菌是原核细胞,胞内DNA以数个环形质粒的状态存在,与组蛋白2a、2b、3、5形成的八聚体结合。
质粒:
质粒是细胞中非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子,是基因工程最常见的运载体。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,大部分的质粒为环状构型,但也存在线形质粒。
远慕生物,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品,赢得客户一致好评,欢迎来电咨询与订购!
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文献和实验需求来确定所用的模板质粒。重组质粒载体构建可以经过酶切酶连、无缝克隆、Gateway 克隆等方式将目的片段连接到目标载体上,或者对载体上的一些元件进行改造。改造好的质粒转入大肠杆菌中进行扩增及抽提。 3、质粒抽提的一般操作流程 从培养的大肠杆菌中抽提质粒,一般需要经过大肠杆菌培养、菌液收集、菌体裂解、基因组 DNA 及蛋白沉淀、质粒吸附、质粒漂洗、质粒洗脱、质粒检测、质粒保存等流程。 内容来源:QIAGEN 凯杰
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臂区域如果 GC 含量过高过低,或者有重复序列,都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构,影响重组效率,可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题:有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建,或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是: ①摇菌时间过长:大肠杆菌生长已经超过对数期,细菌老化,导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足:细菌生长不充分
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