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GW1-PercevalHR,基因文库质粒 基本信息:
启动子: hCMV IE4 promoter
复制子: pUC ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 基因文库质粒;其它基因质粒;其它种源质粒
质粒大小: 7010bp
原核抗性: 氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
筛选标记: 新霉素Neo/G418
克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: 293T等哺乳细胞
诱导方式: 无需诱导
质粒简介:
GW1-PercevalHR质粒通过hCMV IE4 启动子驱动PercevalHR基因的表达,Mammalian expression vector (CMV promoter) of PercevalHR, a fluorescent sensor of ATP-to-ADP ratio.
GW1-PercevalHR,基因文库质粒:GW1-PercevalHR荧光蛋白可以快速高效反应细胞内ATP:ADP比例的变化,准确反应外界因素对细胞内ATP生成和代谢的变化。
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文献和实验相同靶序列的不同限制酶切割; 3)用识别不同靶序列但可产生一致的粘性末端的限制酶切割。 3、特点: 根据上述限制酶的特点,在基因工程和基因诊断中的重要用途: 1) 不论DNA的来源如何,同一种限制酶切割后产生的粘性末端容易重新连接。因此可将不同种属的DNA重组。如人和质粒DNA等。 2) 用于人类基因组的DNA分析,具特定的酶切位点。 3) Gene突变改变酶切位点的消失或新产生将改变酶切片段长度。应用于限制性片段多态性分析。 二、基因运载体及其选择 载体(Vector
用DNA重组技术将某种生物的总DNA用特定的限制性内切酶切割成一个个片段,然后将这些片段随机地连接在某些质粒或其他载体上,再将它们转移到适当的宿主细胞中,通过细胞的增殖而构成各个片段的无性繁殖系(克隆),当这些克隆多到可以包括某种生物的全部基因时,这一批克隆的总体就称为该种生物的基因文库。这一定义也适用于线粒体DNA和叶绿体DNA,分别称为某种生物的线粒体基因文库或叶绿体基因文库。为了有效地保存基因文库,可通过细菌在固体培养基上繁殖而使包含各个特定DNA片段的细菌增多
、45和1000kb。选择载体的主要参数是基因组大小,即基因组DNA序列的长短。 例如,构建大肠杆菌(4.6′ 106kb)等基因组较小生物的基因组文库时,采用质粒作为载体便可得到满意的结果:按每个DNA片段平均长5kb计算,一个包括5000个DNA片段克隆的基因文库就能够代表一个完整的大肠杆菌基因组序列。构建较大基因组的文库时,噬菌体、粘粒以及YAC常被选作克隆载体。 通过转化或转导的方法将带有不同DNA片段的重组DNA分子导入受体细胞,获得一套包含特定生物体所有DNA序列的克隆
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