RIPA缓冲液

缓冲液配制指南

使用 3～5 次。 转移缓冲液 1X 电转液： 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存，1 次溶液可重复使用 3～5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解，冰醋酸调 pH 至 7.2，定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ，1 mL 吐温 20，混匀后即可使用，最好现用现配。 封闭液（含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液） 溶解后使用，一次性使用。 RIPA（中）裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS

细胞凋亡 WB 没成功，你是不是用了 RIPA？

-3, caspase-7, parp and GD1 检测➤ 主要发现p24, p20 存在于 RIPA 提取的蛋白中，但 Laemmli 裂解液提取的蛋白中却不存在。证明了 RIPA buffer 提取蛋白时会人工激活 caspase-3 and caspase-7。用 Laemmli 缓冲液加超声处理可进一步从 RIPA 不可溶性组分中提取出蛋白。例二．Kevin A. Janes,(2016).An Analysis of Critical Factors for Quantitative

多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？

这篇综述重点说明使用 RIPA 裂解液提取总蛋白以及下游实验中可能存在的问题。RIPA 裂解液常用于从脊椎动物细胞和组织中提取总蛋白 [1]。但是由于蛋白质间有较大的差异和非蛋白成份的干扰，所以从一个样本中同时释放和溶解所有蛋白质是非常困难的。特别是一些整合到膜上的蛋白质，或与其他蛋白质 / 核酸形成复合物时，就大大阻碍了提取效率。因此可以推断，蛋白质在提取过程中或多或少的与在体内时真实情况不尽相同。经典 RIPA 裂解液中含有低浓度的十二烷基硫酸钠（SDS 变性剂），脱氧胆酸（干扰蛋白质间