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- YOYOBIO
- 上海
- yjto0143
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
12 个月有效
- 保质期：
见包装
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100ml
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
ACK Lysis Buffer 经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽
类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。本裂解液经过滤除菌，经过 ACK Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白
的提取及各种常规的分析和检测。
| 货号 | 品牌/规格/主要参数 | 市场价 | 货期 | |
| R20172-100ml | ￥70.00元 | 2-3天 | ||
| R20172-500ml | ￥240.00元 | 2-3天 |
产品组成：
ACK Lysis Buffer 100ml 500ml 4℃自备材料：
1、 胰蛋白酶
2、 离心机
3、 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
操作步骤(仅供参考)：
(一)组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入 3～5 倍细胞沉淀体积的 ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解 1～2min。本操作步骤在 4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃，400～500g 离心 5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤 2 和步骤 3 各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬
沉淀。4℃，400～500g 离心 2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的 5 倍以上。
6、如有必要，重复上述步骤 5 一次，共洗涤 1～2 次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)
1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞
悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入细胞 5 倍细胞沉淀体积的 ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解 1～2min。本操作步骤在 4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、加入 15～20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
4、离心：4℃，400～500g 离心 5min，弃红色上清，本离心步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤 2～4 各一次。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(三)血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血，400～500g 离心 5min，弃上清。2、裂解: 加入 6～10 倍细胞沉淀体积的 ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解 1～5min。本操作步骤在 4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。(特别提醒：对于鼠的血液，裂解 1～ 2min 已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至 4～5min，并且裂解过程中轻轻摇动 以促进红细胞裂解。)
3、离心: 4℃，400～500g 离心 5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤 2 和步骤 3 一次。
5、洗涤: 根据实验要求加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃，400～500g 离心 2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的 5 倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
注意： 对于微量或少量的血液样本，可以不用第 1 步操作，可直接加入 10 倍血液体积的 ACK Lysis Buffer 进行第 2 步操作，并在 4℃或室温裂解 4～15min。对于鼠的血液，裂解 4～5min 已经足够； 对于人的外周血，宜延长裂解时间至 10min，但通常不宜超过15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
(四)血液样本的快速操作(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入 10 倍体积的 ACK Lysis Buffer，轻轻吹打混匀，裂解 4～15min。本操作步骤在 4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。（特别提醒：对于鼠的血液，裂解 4～ 5min 已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至 10min，但通常不宜超过 15min，
并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。）
2、加入 20～30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
3、400～500g 离心 5min，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤 2 和步骤 3 一次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
注意事项：
1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在 4℃离心机上操作。
4、常规步骤不快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液 的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤 效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过 ACK Lysis Buffer 处理后的样品后续用于总 RNA 的提取，在处理细胞时不必使用 DEPC 处理的溶液，即无需在该操作中特意去除 RNase。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。
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文献和实验红细胞后进行后续染色实验，两种抗凝管都可使用；如果是采血后进行 PBMC 细胞分离，则必须使用肝素抗凝。 裂解液推荐使用 E-CK-A105 10× ACK Lysis Buffer，不含固定剂。 10× ACK Lysis Buffer 实验前需用纯水稀释成 1×，现配现用，推荐 4℃ 条件下暂存，当天使用。 检测小鼠外周血中常规指标，可用过夜保存的样本，一般来说问题不大，但是对于表达量比较低的指标，建议用新鲜的样本检测。 小鼠外周血中细胞量比较低，建议用先染色后裂解的方法。这种方法可以减少样本
。若直接裂解红细胞进行表面指标染色实验，两种抗凝管都可使用；如果是采血后检测细胞因子，则必须使用肝素抗凝。 2. 裂解液推荐使用10× ACK Lysis Buffer（E-CK-A105），不含固定剂。 3.10× ACK Lysis Buffer实验前需用纯水稀释成1×，现配现用，推荐放在4℃条件下暂存，当天使用。 4. 检测人外周血中常规指标，可用过夜保存的样本，一般来说问题不大。但是对于表达量比较低的指标，建议用新鲜的样本检测。 5. 第三步裂解完后离心弃上清时，建议用移液枪轻轻吸走残液
ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer
ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer Day -2: o Start a 5ml overnight culture from a single colony. Day -1: o Start a larger overnight culture using part of the 5ml culture (subculture). Day
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