荧光素酶 来源于萤火虫

【求助】一个关于萤火虫荧光素酶报告基因的问题？

zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai

萤火虫（Luciolavitticollis）

　　无脊椎动物，昆虫纲，鞘翅目，萤科。身体约长 1厘米，细长而扁平，黑褐色，前胸背和尾端呈暗黄色或桃红色。头隐于前胸下。口尖能咀嚼。少数雌雄虫均有鞘翅，如江、浙一带常见的黄萤（ Luciolaterminalis）和大黄萤（ Luciolasubs-triata），多数仅雄虫有鞘翅，雌虫无鞘翅；鞘翅较软。腹部具有 7或 8节，末端下方有发光器。一般由发光层、反光层和透明的表皮层组成；在发光层内约有 15000多个发光细胞，细胞内有荧光素和荧光素酶两种物质，当虫体呼吸时，在荧光素酶

双荧光素酶报告基因测试

在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品