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文献和实验「铲屎官」注意了!剑桥大学揭示这些基因的改变或让猫猫狗狗成为
细胞 iBMDM 和犬的巨噬样细胞 DH82。结果表明小鼠巨噬细胞感染 2 小时后开始裂解,而犬的巨噬样细胞经过 12 小时仍存活,表明犬的细胞对于鼠伤寒沙门菌的耐受性更高。接着,研究者在小鼠模型上通过 CRISPR-Cas9 技术构建了与 caspase-1/-4 融合蛋白催化作用相当的重组蛋白。小鼠细胞在脂多糖(LPS)刺激下很快裂解,而犬的巨噬样细胞对于 LPS 的刺激则无反应。进一步的体外实验表明,caspase-1/-4 融合蛋白能激活 IL-1β 并且同时切割消皮素 D。图片来源:Cell
实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体,转染 293T 细胞,构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1 载体表达 gRNA 和 Cas9 蛋白。将靶点序列克隆到 pCas9/gRNA1 载体上,gRNA 将诱导 Cas9 蛋白对靶点 DNA 进行切割,造成 DNA 断裂。细胞通过邻端连接
2 2.5 2.5 97.5 3 0.120 3 2.5 2.5 97.5 3 0.130 4 5 5 95 3 0.250 5 5 5 95 3 0.215 6 7.5 7.5 92.5 3 0.331 7 7.5 7.5 92.5 3 0.364 8 10 10 90 3 0.460 9 10 10 90 3 0.442 10 12.5 12.5 87.5 3 0.531 11 12.5 12.5 87.5 3 0.562 12 15 15 85 3 0.633 13
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