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熹垣生物
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NONE322
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20ml
货号XY-821119-20ml
英文名:
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文献和实验【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计;真空抽气
根离子的浓度(mg/L)为横坐标,以峰高(μS)或峰面积为纵坐标,绘制标准曲线或计算线性回归方程。 (2)样品测定 分别吸取空白和试样溶液 50 μL,在相同工作条件下,依次注入离子色谱仪中,记录色谱图。根据保留时间定性,分别测量空白和样品的峰高(μS)或峰面积。5. 分析结果的表述 试样中亚硝酸盐(以 NO2- 计)含量按式(1)计算: 式中: X ——试样中亚硝酸根离子的含量,单位 mg/kg; c——测定用试样溶液中的亚硝酸根离子浓度,单位 mg/L; c0——
30min,对照不加NADH2,以0.4ml蒸馏水代替。3. 保温后立即加1ml对-氨基苯磺酸溶液终止反应,加1mlα-萘胺溶液,显色20min,在台式离心机上离心10min,上清液在分光光度计上测波长540nm处光密度。4. 标准曲线制作和结果计算同活体法。五、注意事项1. 硝酸盐还原过程应在黑暗中进行,以防止亚硝酸盐还原为氨。加异丙醇可增加组织对NO3-和NO2-的透性,厌氧条件可防止氧竞争还原吡啶核苷酸。2. 取样前材料应照光3h以上,大田取样在上午9点后为宜,阴雨天不宜取样。取样部位应
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