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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pCR4-TOPO-IL12A
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μg
pCR4-TOPO-IL12A
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ10645 | pCR4-TOPO-IL12A | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 质粒分类: | 基因文库质粒 |
|---|
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文献和实验一、目的与意义 学习使用限制性内切酶切割带有相应酶切位点的PCR产物,并将克隆载体与外源DNA片段进行体外连接,以构建重组DNA。 二、实验原理 外源基因(DNA片段)很难直接通过细胞膜进入受体细胞,即使进入,也会受到细胞内限制性酶的作用而分解。要将外源DNA片段导入受体细胞,必须选择适当的载体(Vector)。 载体是携带外源基因进入受体细胞的工具,作为载体的DNA分子,需具备三个基本
许多真核生物的基因所包含的DNA,远非单个重组子所能容纳得了的,因此要把克隆扩展成叠连群,而这又需要高库容量且无大缺口的基因组文库。此法能否成功,还取决于对这些大的、非嵌合性的、并且序列未知的基因组5’和3’端的有效鉴别。许多技术已用于简化这一过程及避免克隆载体和克隆DNA之间的连接区,本文着重介绍了其中一种不失为较为简单便宜的单一位点PCR方案操作过程。详情请查看下列pdf文件:“分离小载体PCR” (如果你无法在线阅读pdf文件,敬请下载安装adobe reader,官方下载,天空
3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T
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