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- ZKbscience
- ZK-0019779
- 中国/美国
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
p3xFlag-CMV-14
- 保质期：
三年
- 供应商：
再康生物
- 保存条件：
常温
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 哺乳细胞表达载体 |
|---|---|
| 启动子: | CMV |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6310 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
| 3' 测序引物: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
| 载体标签: | C-3xFlag |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄 青 霉 素) |
| 筛选标记: | Neomycin (新霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| ZK1971 | p3xFlag-CMV-14 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体，从pCMV5载体衍生而来，用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp）。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。
载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。
pP3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系，如COS细胞，复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。
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文献和实验1.常用载体分类：2,常用载体元件介绍：(1) 启动子：启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子；特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG，CMV，EF1a，PGK等，还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子；常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn，投射神经元特异性启动
750X2+500X2 (DL2000 plus) P10: 3k+2k+1k+800+600 P11: 3k+1k+800+600 P12: 2k+1k+800+600 P13: 2k+1kX2 (专用于2K和1K的制备) P14: 2K P15: 3K P16: 4K P17: 5K P18: 6K P19: 8K P20: 10K II: PCR 扩增制备DNA marker 新技术(有别于上述载体发酵) 基于PCR 技术生产DNA marker 技术的新突破，成本
. 质粒拷贝数低： 由于使用低拷贝数载体引起的质粒 DNA 提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体。 11. 菌体中无质粒： 有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如，柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 12. 碱裂解不充分： 使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液 P1、P2 和 P3 的用量
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