猴可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)酶联免疫试剂盒

我公司长期供应种类齐全的完整ELISA试剂盒，种属有人 （Human）、 大鼠 （Rat）、小 鼠（Mouse） 、猴（Monkey） 、兔（Rabbit） 、猪（Pig） 、马（Horse） 、鱼、鸡、 鸭、羊等等；标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等 等，所有试剂盒均经过充分验证，保证有效且重复性佳。本公司所有产品均科研实验专用，不得用于临床诊断，请按说明书严格操作，上海笃玛欢迎您的来电订购！

Elisa试剂盒名称：猴可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)酶联免疫试剂盒
Elisa试剂盒：96T/48T
Elisa试剂盒种类：进口Elisa试剂盒分装和原装Elisa试剂盒、国产Elisa试剂盒
上海笃玛生物科技有限公司对现在市面上的既有国产也有进口，数量繁多令人目不暇接，怎样才能选出最适用的产品呢？首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测，除此以外也还有一些需要加以考量的因素。
1. 抗体类型
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA，实际上有时候二者结合效果更好。例如，对于双抗夹心法而言，用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。多抗能够确保捕获所有抗原，随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
双抗夹心法ELISA中捕获抗体与检测抗体（不论多抗还是单抗）的配对很有讲究。我们不希望捕获抗体与检测抗体竞争抗原上的同一位点，为此我们就需要确保捕获抗体和检测抗体所识别的抗原表位不存在重叠。如果捕获抗体和检测抗体之间发生了冲突，就会对实验结果产生较大影响。要避免这一问题，我们可以选择购买“matched pair”的捕获/检测抗体对，这些打包在一起的抗体是商家经过验证才推荐的好组合。
2. 实验类型
ELISA试剂盒有多种类型，不过它们都有一个共同特点，就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cell ELISA和酶联免疫斑点ELISPOT是两种特殊的类型，In-cell ELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化，然后再用抗体原位检测。ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot，先在带膜的微孔板中培养细胞，然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外，还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。
通常人们使用双抗夹心法进行ELISA实验，双抗夹心法中抗原被夹在捕获抗体和检测抗体之间，这种方法既灵敏又有效，受到了许多研究者的青睐。不过有时候双抗夹心法并不是最佳选择，例如有时候抗原特别小让两个大抗体难以附着，又或者抗体只有一个抗体结合位点。在上述情况下，竞争性ELISA就更为适用，这种方法是采用带标记的纯化抗原与样本中无标记的抗原进行竞争，以结合捕获抗体。
3. 检测方式
如今检测ELISA有许多途径，我们可以根据自己的偏好进行选择。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物，抗体上结合有相应的酶（例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP），而反应体系中添加有相应的底物（如3，3-二氨基联苯胺DAB）。这种酶促反应生成具有特征性的颜色，可以通过分光光度计进行检测，碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。酶可以结合在一抗上，也可以结合在二抗上，还可以使用链霉亲和素标记的酶与亲和素标记的一抗结合。此外ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
4. 交叉反应
如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。尽管现在购买源自指定动物的抗体越来越容易，我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行ELISA检测时，检测用的二抗必须特异性针对检测一抗，而不能与捕获抗体起反应。如果检测用二抗与捕获抗体结合，实验特异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗，来避免上述问题。与此同时，了解试剂盒中提供的buffer也是有必要的（例如washing buffer和blocking buffer），以免这些buffer含有可能影响抗原抗体相互作用的组分，使检测结果收到影响。

猴可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)酶联免疫试剂盒显色步骤结束后，酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。

原因分析
1.试剂已过效期，或不同试剂盒组分混用
2.错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B
3.洗板及加样过程中，酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力
4.终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配置
5.蒸馏水有问题

对策
1.检查试剂的组分及批号，确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.严格按说明书的步骤操作，加完试剂后可观察一下液面高度是否一致，以减少漏加现象
3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净
4.每次配制时都应看清标签标明物质
5.确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染，与好蒸馏水比较
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DM-M57138 猴白介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒
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