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- 文献和实验
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-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pBABE-neo largeT cDNA
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μg
pBABE-neo largeT cDNA
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0881 | pBABE-neo largeT cDNA | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 质粒分类: | 病毒系列载体;大T抗原逆转录病毒表达质粒 |
|---|
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文献和实验2)、哺乳动物/真核表达载体 pcDNA3.1+ 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA3.1- 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA4/V5-His A, amp 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisA 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisB 含His标签
年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型[1]。直到现在,运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法。(1)利用同源重组构建基因敲除动物模型的基本步骤:①. 基因载体的构建:把目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA 分子都重组到带有标记基因(如neo 基因,TK 基因等)的载体
(3)进行RT-PCR,扩增VH、VL基因,并克隆,测序验证。 3. 嵌合基因的构建 目的基因和载体分别经相应酶切后,将VH基因插入带有人重链γ3恒定区基因的pSV2gpt质粒中构建成人-鼠嵌合重链基因。将VL基因插入带有人轻链κ恒定区基因的pSV2neo质粒中,构建成人-鼠嵌合轻链基因。然后将连接产物转染大肠杆菌,扩增培养,并制备大量质粒共真核细胞转染用。
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