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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pmCherry-EGFP-LC3B-h
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μl
pmCherry-EGFP-LC3B-h
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0446 | pmCherry-EGFP-LC3B-h | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori,SV40 ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞,自噬表达载体 |
| 质粒大小: | 5833bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | Neo |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | Sv40-polyA-R:GAAATTTGTGATGCTATTGC |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验本人持有以下载体及基因:(原则上只交换不赠送,欢迎广大站友互通有无) QQ 2283524599 luckamily@126.com 一、载体 1)、miRNA载体 Promega miRNA靶标克隆载体 psiCHECK-2 psiCHECK2 amp Ambion miRNA靶标克隆载体 pmiR-report pmiRreport amp Invitrogen miRNA过表达载体 PCDNA TM 6.2-GW/EmGFP-miR
-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶;小牛血清;G418;DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter;含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2,获得长4.7 kb的EBVR,包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP,克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
,比如说,你用的是PLEGF载体,抗性为G418,按不同的浓度检测如:200μg/ml、400μg/ml----1200ug/ml共6个梯度,细胞量最好的1000Cell/ml,以10-14天最低浓度至全部细胞死亡为最佳浓度,我用的是PT67最佳浓度为800ug/ml4、转染,观察24-48h的转染情况,如达40%以上,可加入G418筛选,3-5天换一次带药的培养液,一般在15天即可,具体还看转入不同基因可以有差异,得到较高带EGFP的细胞。5、扩大培养,收集上清。6、收集到的上清可以做密度
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