嘌呤霉素试剂说明书

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嘌呤霉素试剂说明书由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多嘌呤霉素试剂等抗生素类产品请联系我司咨询订购。

名称：嘌呤霉素试剂说明书
产地：国产|进口
编号：QN0078
品牌：百奥莱博
本品是蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
储存条件：-20℃
纯度：≥98%(TLC)
性状：白色或白中带有黄色的粉末
别名：二盐酸嘌呤霉素;嘌呤霉素盐酸盐
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

使用方法：

1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。

2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。

3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2：
a)准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL，至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。

4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后，将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。

除嘌呤霉素试剂说明书外，我公司正在打折促销以下产品：

·凝血酶
编号：QN0461
英文名称：Thrombin from bovine plasma
规格：1000u
凝血酶：催化纤维蛋白原变成纤维蛋白而促使血液凝固，用于止血。

来源：牛血清

别名：凝血酵素;Factor IIa
英文名称：Thrombin from bovine plasma
CAS号：9002-04-4
储存条件：−20℃
酶活：7mg solid;143NIH units/mg solid
性状：白色、浅黄色或浅灰色冻干粉

·乙酸钠(pH5.2)
编号：QN0930
英文名称：3M Sodium acetate, pH 5.2
规格：500ml
本品为3M的乙酸钠溶液，pH为5.2。乙酸钠可用于测定铅、铜、镍和铁等，也是一种常用的缓冲剂。在核酸提取中，加入乙酸钠缓冲液，可调节盐离子的浓度，中和核酸分子的负电荷，便于加入乙醇后使DNA沉淀下来。

别名：醋酸钠
分子量：136.08
储存条件：室温，有效期一年。

配制方法：
3 M 乙酸钠(pH=5.2)的配制：在800ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰醋酸调节pH值至5.2，加水定容至1L，分装后高压。

·硫酸铵
编号：QN0606
英文名称：Ammonium sulfate
规格：500g
本品广泛应用于分子生物学。生物制剂，沉淀蛋白质，色谱分析试剂，单倍体育种中配制培养基等科研领域。

CAS号：7783-20-2
分子式：(NH4)2.SO4;H8N2O4S
分子量：132.13
纯度：99%
性状：白色晶体颗粒
溶解性：易溶于水，不溶于乙醇
储存条件：18～25℃，避光防潮密闭干燥


嘌呤霉素试剂说明书关键词：二盐酸嘌呤霉素,嘌呤霉素盐酸盐,嘌呤霉素试剂
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BOC-D-缬氨酸 ConA 22838-58-0
CYB167023 羊抗人白蛋白
ARB10966 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)免费代测 Human receptor Ⅱ for the fc region of immunoglobulin e,fcεrⅡ ELISA KIT
ARB10619 人血栓前体蛋白(TpP)Elisa定量检测 Human thrombus precursor protein,tpp ELISA KIT
CBZ-L-苯丙氨酸 5"-ATP,Na2 1161-13-3
CYB163029 羊抗人IgG、A、M-RBITC
3-氨基-9-乙基咔唑 Amino black 10B 132-32-1
PY01-186 脑心浸粉(牛) 250克
ARB10347 人分泌成分(SC)elisa检测说明书 Human secretory component,sc ELISA KIT
BL0282 改良型RPMI 1640
F030505 FITC标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*FITC
5(6)-羧基荧光素 Orotic acid 72088-94-9
磺胺甲基嘧啶 Alcohol Oxidase 127-79-7
BL0878 兔抗人IgM免疫血清 0.5ml
E0606 脱纤维裂解驴血(无菌) 100ml/500ml
HC0178 杂交袋
ARB13916 猪肠三叶因子(ITF)酶免分析 Porcine intestinal trefoil factor,itf ELISA KIT
氯吡苯脲 Naphthol green B 68157-60-8
ARB10232 人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA检测服务 Human monocyte interferon gamma inducing factor,migf ELISA KIT
胃蛋白酶抑制剂 D-Cysteine 26305-03-3
ARB11625 人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)ELISA代测服务 Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor，gm-csf ELISA KIT
嘌呤霉素试剂说明书关键词：二盐酸嘌呤霉素,嘌呤霉素盐酸盐,嘌呤霉素试剂
嘌呤霉素试剂的纯度及用途：纯度高质含量低，适用于研究和配制标准液； 纯度较高，杂质含量较低，适用于定性和定量分析 重量略低于二级试剂，用途近似二级试剂 化学试剂按纯度由低到高可分为工业纯、实验纯（LR）、化学纯（CP）、分析纯（AR）、优级纯（GR）和超纯等多种规格。


ARB12201 大鼠皮质醇(CortIsol)Elisa方法检测 Rat cortisol ELISA KIT
DP333 大量血液基因组DNA提取试剂盒
DN3801 新型大量植物DNA快速提取试剂盒
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ARB10562 人丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)elisa测定使用说明书 Human mitogen activated protein kinase kinase 6,mkk6 ELISA KIT
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PY01-171 酚酞 ind 25克
ARB10900 人抗斑疹伤寒抗体(Anti-typhus-Ab)定量分析 Human anti-typhus antibody ELISA KIT
D-酒石酸 Berberine chloride hydrate 147-71-7
2′-脱氧鸟苷-5′-三磷酸三钠盐 Thymol blue 93919-41-6
J0205 兔抗辣根过氧化物酶抗血清
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我公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售R&D、Sigma、Amresco 、Gibco、Pharmacia、HyClone、GIBCO等多个国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。 公司主要产品：试剂盒：嘌呤霉素试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂、细胞凋亡试剂盒。各种动物血清：NBQQ、HyClone、GIBCO胎牛血清。抗体：进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗。 我们立足于生命科学领域，全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链，立志成为生命科学研究领域的问题解决专家。

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