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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
- 库存:
326
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒促销,我公司销售高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:北京现货细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒促销
规格:100T|500T
英文名:Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
产地:国产|进口
本试剂盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双染的方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+强蓝色荧光。
染色快速方便,两种染料的染色仅需20-30分钟,一步染色即可完成。 使用方便,使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。 本试剂盒足够检测100个样品,每个样品的细胞数量可以为1×105-1×106。
使用说明:
1. 每个样品收集约10-100万细胞于1.5ml离心管内,离心弃上清。细胞沉淀用0.8-1ml细胞染色缓冲液重悬。
2. 加入5微升Hoechst染色液。
3. 加入5微升PI染色液。
4. 混匀,冰浴或4℃孵育20-30分钟。
5. 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。
6. 如果使用荧光显微镜检测,检测前离心沉淀细胞,用PBS洗涤一次,再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测,可以不收集细胞,直接依次按照上述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分钟。染色后PBS洗涤一次,再在荧光显微镜下观察。
注意事项:
1、需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。 染色后宜尽快检测。
2、Hoechst 33342对人体有害,碘化丙啶(PI)对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期1年。
更多有关北京现货细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·2,3-二巯基丁二酸
编号:QN0803
英文名称:Succimer
规格:5g
CAS号:304-55-2
分子式:C4H6O4S2
分子量:182.22
性状:白色结晶性粉末。
溶解性:不溶于水,易溶于碱性溶液,微溶于甲醇。
储存条件:−20℃
·原儿茶酸
编号:QN0592
英文名称:3,4-Dihydroxybenzoic acid
规格:5g
CAS号:99-50-3
别名:3,4-二羟基苯甲酸
分子式:C7H6O4
分子量:154.12
·葡萄糖-6-磷酸一钠
编号:QN0171
英文名称:G-6-P-Na;D-Glucose 6-phosphate sodium salt
规格:100mg
别名:β-D-葡萄糖-6-磷酸钠盐;6-磷酸葡萄糖钠盐;6-磷酸葡萄糖酸一钠盐
CAS号:54010-71-8
分子式:C6H12O9PNa
分子量:282.12
储存条件:2~8℃
纯度:≥98.0%
性状:白色结晶性粉末
·头孢唑啉钠
编号:QN0057
英文名称:Cefazolin sodium salt
规格:5g
CAS:27164-46-1
分子式:C14H13N8NaO4S3
分子量:476.49
储存条件:2~8℃
别名:唑啉头孢菌素钠
·噻唑蓝MTT
编号:QN1307
英文名称:Thiazolyl blue tetrazolium bromid
规格:250mg|1g
本品常用于生化研究中酶活力的测定,也可用于细胞增殖检测。
CAS号:298-93-1
分子式:C18H16N5SBr
分子量:414.3
纯度:≥98%
性状:黄色粉末
溶解性:溶于甲醇和DMSO,微溶于水
储存条件:2~8℃避光
·TG酶-肉丸专用
编号:QN0370
英文名称:Thiazolyl blue tetrazolium bromid
规格:500g
本品常用于生化研究中酶活力的测定,也可用于细胞增殖检测。
CAS号:298-93-1
分子式:C18H16N5SBr
分子量:414.3
纯度:≥98%
性状:黄色粉末
溶解性:溶于甲醇和DMSO,微溶于水
储存条件:2~8℃避光
·Hoechst 33342 染色液(即用型)
编号:QN1322
英文名称:Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use)
规格:10ml|50mL
本Hoechst 33342染色液为即用型,可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。
使用说明:
1. 对于固定的细胞或组织:
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量Hoechst 33342染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后应立即观察。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
北京现货细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒促销关键词:Hoechst 33342/PI Double Stain Kit,细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒,QN1315
·苯甲酸苄酯
编号:QN0821
英文名称:Benzyl benzoate
规格:500ml
CAS号:120-51-4
·诺尔丝菌素
编号:QN0024
英文名称:Nourseothricin Sulfate
规格:100mg|1g
CAS:96736-11-7
分子式:C31H58N12O10 C19H34N8O8 H2SO4
分子量:1359.47
纯度:98%
储存条件:2~8℃
·Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸盐二水合物
编号:QN1292
英文名称:Nourseothricin Sulfate
等级:≥99%
规格:10g
别名:二水腺嘌呤硫酸盐
CAS号:6509-19-9
储存条件:RT
·10×多聚赖氨酸
编号:QN1250
英文名称:Poly-L-lysine Solution,10×
等级:≥99%
规格:10ml
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。
应用:
适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。
玻片处理:
1. 灭菌水稀释聚赖氨酸溶液,一般的使用浓度为0.01%。
2. 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
3. 在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
注意:
1. 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力。
2. 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3. 释过的多聚赖氨酸溶液要放在2~8℃,至少在3个月内是稳定的。
4. 用过的稀释液要过滤,若出现浑浊或长菌要丢弃
5. 多聚赖氨酸浓度可以高一些,吸出来的可以重复利用至少20次。
培养瓶处理:
1. 包被培养板或者是培养瓶,一般多聚赖氨酸浓度为0.01%,
2. 准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。
3. 0.01%的多聚赖氨酸以50微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面,室温下静置5min,吸除多余液体。
4. 加入灭菌水,反复冲洗三次,无菌操作。
5. 处理后无菌晾干备用。
6. 回收后保持无菌的多聚赖氨酸可反复利用。
常用的配合物质可分为五类:
1、酒精,使用量为30~70%,主要应用于各种蛋制品。
2、有机酸,常常使用的有机酸一般有:醋酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸等,使用量在0.5~50%之间,主要应用于米饭、饮料、色拉、酱类等食品;
3、甘油酯,甘油酯多为低级脂肪酸酯,用量在0.01~5%之间,主要用于动物性蛋白,乳蛋白较多的食品。
4、甘氨酸,用量为0.01~10%;主要应用于牛奶防腐。
5、其它天然抑菌剂,如:鱼精蛋白、茶多酚等。
储存条件:-20℃保存,有效期2年
北京现货细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒促销关键词:Hoechst 33342/PI Double Stain Kit,细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒,QN1315
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文献和实验Hoechst33258(或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 (或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液:称取Hoechst33258(或Hoechst33342)1mg,用20ml蒸馏水溶解,过滤,4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液,pH7.0。 固定液:4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化,用PBS洗5min; 或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min; 或细胞
亚“G1 ”峰方法简便,但只是代表G0 /G1 期发生凋亡的细胞,S期和G2 期细胞凋亡发生于G1 峰后,无法观察。此外,由于全部细胞均经固定,因此不能区别死细胞和活细胞。Hoechst-PI染色则可弥补上述不足。Hoechst 33258 可被活细胞摄取,与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。因此在细胞二维直方图上根据红蓝两种荧光可分辨三种细胞:正常活细胞对染料有拒染性,蓝色和红色荧光均较少;凋亡细胞有膜通透性改变,主要摄取Hoechst染料,表现为强蓝色
2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时
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