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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
PI Staining Solution (Ready-to-use)
- 库存:
703
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:PI Staining Solution (Ready-to-use)
编号:SY0582
规格:150T
本品是无菌的即用型PI染色液(溶于PBS),可进入死细胞内与DNA结合,并被活细胞排斥在外,适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测,若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测。
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发,产生相对较大的斯托克司频移后,并在617 nm处具有最大发射波长。另外,PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性,PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用;也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
使用方法
1)收集细胞,计数,最高以1 x 106 cells/100 μl的量加入FACS分选管;
2)加2ml PBS(或HBSS)清洗细胞,300 x g离心5 min,去上清。重复一次。
注:若需要用抗体标记表面抗原,可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。
3)细胞清洗后,用100 μl流式细胞染色缓冲液(flow cytometry staining buffer)重悬细胞;加入10 μl PI染色液,轻柔混匀,冰上或者室温避光孵育10-15 min。
4)直接上机进行流式分析。注:PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。
注意事项
1)碘化丙啶(PI)是已知的诱变剂,操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。
2)流式细胞染色缓冲液可配制如下:1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA(或 5% FBS)+0.1% 叠氮钠。也可根据实验室自身体系调整。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃,有效期半年
想要了解更多关于碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
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碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应关键词:碘化丙啶(PI)染液(即用型),SY0582,PI Staining Solution (Ready-to-use)
·免疫染色用一抗二抗稀释液
编号:SY0778
英文名称:Primary&Secondary Antibody Diluent for Imunostaining
规格:100ml
本产可用于多种免疫染色时一抗二抗工作液的稀释和配制,制备的工作液可于4℃保存和使用至少6个月,不仅节约了宝贵的抗体,又能节省时间,简化操作。本品经特殊优化组分,能够降低染色背景,提高信噪比。
配制好的一抗二抗工作液可直接用于相关免疫染色实验(IF)。
使用方法
根据一抗/二抗的使用说明书用本稀释液进行一定倍数的稀释,需同时考虑到目的抗原的表达量和相应一抗/二抗的加入量。抗体稀释后可直接用于免疫染色。
注意事项
1)本品稀释液含有磷酸盐,不可用于碱性磷酸酶标记的二抗的稀释。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃,有效期一年。
·萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
编号:SY0058
英文名称:Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格:100T|500T|1000T
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit),是通过萤火虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin,在荧光素的氧化过程中,发出生物荧光(bioluminomescence),然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。
产品特点
1)简便,快捷。
2)灵敏度高,可检测10-20 mol的荧光素酶。
3)安全,非放射性。
4)酶的浓度线性范围可达8个数量级。
产品组份:
| 组分 | 100T | 500T | 1000T |
| 细胞裂解液 | 60ml | 60ml×5 | 60ml×10 |
| 萤火虫荧光素酶检测试剂 | 10ml | 10ml×5 | 10ml×10 |
保存:未拆封试剂盒-20℃避光保存,有效期为 6 个月。-70℃避光保存,有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)避光保存,不能反复冻融。
实验步骤
1. 细胞裂解:
1)将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液(Cell lysis buffer),然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min,充分裂解细胞。
| 细胞培养板 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
| 细胞裂解液(µl/孔) | 30µl | 60µl | 120µl | 250µl | 500µl |
【注】:裂解产物可室温保存6h,4℃保存16h,-70℃可长期存放。(裂解产物不能多次反复冻融)。
2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测:
1)按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10s,测定间隔为2s。
2)将样品按照20~100µl的体积(如果样品量足够,请加入100µl)加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)混匀 2-3 次(不能漩涡混匀),充分混匀后测定RLU(Relative light unit),同时设置细胞裂解液(Cell lysis buffer)为对照孔。
注意事项
1)温度会对酶的活性会产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用。
2)如用单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3)萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为 560nm。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应关键词:碘化丙啶(PI)染液(即用型),SY0582,PI Staining Solution (Ready-to-use)
·Hoechst 33258 DNA染料
编号:SY0497
规格:10mg
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
中文名称:二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名称:2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
CAS:23491-45-4
纯度:≥95%(HPLC)
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我公司生产供应销售的探针标记及检测正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购碘化丙啶(PI)染液(即用型)供应。
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文献和实验胰蛋白酶消化(37℃、30 min)分散, 置于4℃冷乙醇中固定后, 在1×109个细胞/L密度的细胞悬液中加入1 ml碘化丙啶(PI)染液(100mg/L), 4℃染色30 min, 用FACS流式细胞仪测定荧光强度, 激发波长488 nm,每次测定106 个细胞。采用Modfit 分析软件进行细胞DNA含量分析, 低于G1 期二倍体DNA含量的细胞为凋亡细胞。2、 FACS检测凋亡细胞的亚二倍体DNA. 新鲜小鼠胸腺细胞细胞加入75%乙醇过夜, 次日用PBS洗2次, 加入PI(碘化丙啶)低渗染液
Annexin V-PI 双染法 在细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在DNA片段化之前,因而检测PS的表达,能反映早期凋亡。AnnexinV是相对分子质量为35 000大小的Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,对PS有很高的亲和性,并且可以与暴露于细胞外的PS相结合。利用这一原理,可以将AnnexinV标记荧光来识别早期的细胞凋亡。通常利用AnnexinV-FITC和碘化丙啶(P1)来区分凋亡和坏死细胞。PI
荧光,弱红色荧光;坏死细胞由于有很强的PI嗜染性并可覆盖Hoechest染色,故呈弱蓝色强红色荧光。 【材料及试剂】 (1)碘化丙啶(PI)贮存液:100mg/ml,4℃避光保存。 (2)Hoechst 33258贮存液:100mg/ml,4℃避光保存。 (3)0.01mol/L PBS pH 7.0~7.2 【操作步骤】 (1)常规制备单细胞悬液; (2)加入Hoechst 33258 溶液,使其终浓度为1mg/ml,37 ℃水溶,7分钟; (3)冰上冷却, 离心弃
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