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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Biotin 3' End DNA Labeling Kit
- 库存:
240
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京现货生物素标记DNA试剂盒(TdT加尾法)厂家直销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:生物素标记DNA试剂盒(TdT加尾法)
编号:YT030
产地:国产|进口
英文名:Biotin 3" End DNA Labeling Kit
规格:20次
品牌:百奥莱博
本试剂盒是一种通过TdT把生物素标记的dUTP添加到DNA 3"末端的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰杂交反应,也不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测;因此生物素标记的DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、EMSA(即gel shift)以及colony hybridization或原位杂交等。
TdT可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。
本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
试剂盒组分:
| TdT Buffer(5X) | 250μl |
| TdT(10U/μl) | 20μl |
| Biotin-11-dUTP(5μM) | 100μl |
| Biotin-Control Oligo(0.4μM) | 100μl |
| Ultrapure water | 1ml |
| 探针标记终止液 | 200μl |
| TE | 15ml |
储存条件:-20℃。
关键词:生物素标记DNA试剂盒(TdT加尾法),Biotin 3" End DNA Labeling Kit,YT030
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文献和实验探针。此法省略了生物素-亲合素中间步骤,可减少非特异性反应。 4.生物素酰肼胞嘧啶修饰法在亚硫酸盐催化下,生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基而得生物素化寡核苷酸探针。 5.寡核苷酸的酶促加尾标记法在末端转移酶的作用下,用非放射性物质修饰的核苷酸(生物素dATP;生物素-dUTP;地高辛-dUTP)可加到DNA的3’末端,每个探针DNA可加上10~20个修饰碱基。 (1)取-0.5ml硅化塑料 离心管 ,插入冰浴中
4激酶(5')或TDT(3')端标记α-32 P用于短探针的标记cDNA探针的标记RNA探针的标记掺入标记-32 P或生物素光促标记光敏生物素光敏地高辛生物素补骨脂素光DNP(2,4-二硝基苯)溴钨灯12V,100W 紫外灯(365nm)日光灯(275W)化学修饰合成法氨基(NH2 )硫基(SH)5'-OH基5'-磷酸基化学合成(一)非同位素标记 1 半抗原标记法 在核酸分子上用半抗原标记制备成免疫核酸探针,使之能用免疫学方法去检测。例如光激活的2,4-DNP作为标记试剂。它要求有一高度亲和
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和杂质,原理如下:1)用一生物素标记的单链RNA探针与待扩核酸杂交,杂交区域是非扩增区;2)用包被链霉亲和素的固相载体来捕获带有生物素探针的杂交核酸,通过漂洗可去除污染的扩增产物和杂质;3)洗脱靶分子后用特异引物扩增非RNA探针杂交区域。第2)步的漂洗后可用PCR检测以确定标本是否被扩增产物或重组质粒污染。 (五)RS-PCR法(RNA-specific PCR) 也称为链特异性PCR,主要指用于RNA模板的特异性PCR法,该法可明显降低假阳性而不影响PCR的敏感性。其关键在于设计引物,逆转
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