超灵敏ECL化学发光试剂盒说明书

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北京百奥莱博专业生产销售超灵敏ECL化学发光试剂盒说明书，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：超灵敏ECL化学发光试剂盒说明书
编号：YT061
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
规格：共100ml
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。

本试剂盒灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。


检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。

关于超灵敏ECL化学发光试剂盒说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·T3 RNA聚合酶
编号：YT408
英文名称：T3 RNA Polymerase
规格：500U
本酶来源于由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T3 RNA Polymerase基因，是一种高度特异识别T3启动子序列的DNA依赖的5"→3"RNA聚合酶。T3 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T3启动子下游NTP的掺入，合成与T3启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点：T3 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T3启动子有高度的特异性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

活性定义： 37℃60分钟内，催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T3 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
失活或抑制：70℃加热10分钟可使T3 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T3 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T3 RNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃


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·超氧化物阴离子荧光探针DHE
编号：YT301
英文名称：Dihydroethidium
规格：5mg
本品是最常用的检测细胞内超氧化物阴离子水平的荧光探针。Dihydroethidium可以溶解于DMSO，配制成适当的母液。

Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后，可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢，产生ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的ethidium较多，红色荧光就较强，反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测。

Dihydroethidium本身为蓝色荧光，最大激发波长为370nm，最大发射波长为420nm，脱氢后和RNA或DNA结合产生红色荧光，最大激发波长为300nm，最大发射波长为610nm，实际观察时也可以使用535nm作为激发波长。

用于细胞内超氧化物阴离子检测时，Dihydroethidium的常用浓度为1-10μM。通常用含有0.5-5μM的Dihydroethidium的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30分钟左右进行荧光探针装载，随后可以适当洗涤，接着可以直接用流式细胞仪或其它适当荧光检测仪器进行检测。

分子式：C21H21N3
分子量：315.41

注意事项：
1. Dihydroethidium易在空气中氧化，请尽量避免暴露于空气中。
2. Dihydroethidium脱氢后产生毒性较高的ethidium，请注意防护。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，有效期半年。


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