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室温
12个月
A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售高纯质粒大量制备试剂盒折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:高纯质粒大量制备试剂盒折扣价
编号:ALH089
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:10次
英文名:A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)|高纯质粒大量制备试剂盒
关于高纯质粒大量制备试剂盒折扣价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·平末端克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
编号:ALH333
英文名称:Zero Background TOPO-Blunt Cloning Kit (with MCS)
规格:20次|80次
本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同,它依据拓扑异构酶可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA*(代"片")段的原理采用本公司独特的工艺制成。
试剂盒组份(20次):
TOPO-Blunt Vector(30ng/μl)————20μl
1000bp Control(40ng/μl)————5μl
10×Enhancer———————————20μl
产品特点:
1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO 平末端克隆载体。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
·PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)
编号:ALH378
英文名称:PAGE protein staining kit
规格:250ml|1000ml
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质,它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度(ng级水平或者更高),但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方,蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成,因此蛋白条带仍旧保持透明无色,在黑色的背景下,就可以清晰见到透明的蛋白条带。
试剂盒组份(250ml):
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml
产品特点:
1.电泳后采用两个简单步骤,15分钟内完成全部过程。
2.环保染料,完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带,灵敏度为传统方法的10倍以上(纳克级或者更高)。
4.可逆染色,完全不影响蛋白性质,不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱(切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用)、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上,不退色,缩小,蛋白质不扩散,一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。
操作步骤:
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟,然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中,根据胶大小倒入适量的染色液(确保胶都浸没在染色液内,20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了),摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟,5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液,加入20-25ml 的显色液,立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟(将透明培养皿放在一个黑色(暗)背景上观察条带出现情况,此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带,不要显色时间过长,过长反而会降低分辨率)。
3) 看到满意条带后,用清水冲洗1-2 分钟后,放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液,摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全,最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱,Western blot 等操作,或者可以再用传统方法永久染色。
问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看,条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况,一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶,可以用脱色液部分脱色(胶脱色后,还可以再次反复染色)。
3. 蛋白浓度太低了,检测上样蛋白的浓度。
●干胶后,条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法,干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了,因此不可以做成干胶。如果要长期保存,可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。
储存条件:室温避光,有效期12个月。
高纯质粒大量制备试剂盒折扣价关键词:高纯质粒大量制备试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)
·高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)
编号:ALH078
英文名称:High purity plasmid small amount rapid extraction kit
规格:100次|200次
本试剂盒适用于小量提取高纯度的质粒。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
平衡液—————————————10ml
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
去蛋白液PE———————————31.5ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独特的去蛋白液配方,可以高效去除残留的核酸酶,即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14-16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-
20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
高纯质粒大量制备试剂盒折扣价关键词:高纯质粒大量制备试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)
D-组氨酸 D-Phenylalanine 351-50-8
BTN130544 AEBSF溶液 AEBSF Solution
BL1115 Hoechst 33342染色液(即用型)
PY04-060 甘油液 5ml/支×10支 每支添加于90mlCN琼脂培养基基础中,用于铜绿假单胞菌检测与计数-滤膜法
59-30-3 Folic acid(Vitamin M) 叶酸
BTN91102 柱式骨骼DNAOUT Column Bone DNAOUT
L-脯氨酸苄酯盐酸盐 C12E10 16652-71-4
BTN131205 WGA糖蛋白分离试剂盒 Glycoprotein Isolation Kit(WGA)
ARB13071 小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)代做ELISA实验 Mouse tumor necrosis factor β,tnf-β ELISA KIT
BTN60701 土壤DNAOUT Soil DNAOUT
E0616 抗凝裂解大牛血 100ml/500ml
亚甲基蓝 Oxalacetic acid 7220-79-3
BL0285 MEM/EBSS
草酸亚铁二水合物 Linoleic acid 6047-25-2
BTNygtz22 荧光探针和示踪剂 Fluorescent Probe and Tracer
ARB11378 人前病毒整合位点1(PIm1)Elisa定量检测 Human proviral integRation site 1,pim1 ELISA KIT
HC0133 擦镜纸
ARB10464 人生长激素释放肽(GHRP-Ghrelin)酶标法分析 Human growth hormone releasing Peptide-ghrelin,ghrp-ghrelin ELISA KIT
BL1046 马丁氏肉汤
F040318 牛IgG抗原 Bovine IgG
ARB12401 大鼠降钙素(CT)含量测试 Rat calcitonin,ct ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购高纯质粒大量制备试剂盒折扣价。
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