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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
6个月
- 英文名:
RNA extraction kit for fibrous tissue
- 库存:
248
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)批发由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)批发
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:RNA extraction kit for fibrous tissue
本试剂盒适用于快速提取心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织RNA,采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| 裂解液RLT | 20ml | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
| 漂洗液RW | 5ml | 10ml |
| RNase-free H2O | 20ml | 40ml |
| 蛋白酶K(40mg/ml)(可选) | 10mg | 20mg |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵,水浴锅等。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月
本品别名:RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)|纤维类组织RNA提取试剂盒|心脏RNA提取试剂盒|骨骼肌RNA提取试剂盒|血管RNA提取试剂盒|气管RNA提取试剂盒|皮肤RNA提取试剂盒
除RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)批发外,我公司正在打折促销以下产品:
·平末端克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
编号:ALH335
英文名称:Zero Background TOPO-Blunt Cloning Kit (without MCS)
规格:20次|80次
本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同,它利用了拓扑异构酶可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA*(代"片")段的原理采用本公司独特的工艺制成。
本试剂盒在克隆插入位点两侧不含多克隆酶切位点,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。
试剂盒组份(20次):
TOPO-Blunt Simple Vector(30ng/μl)————20μl
1000bp Control(40ng/μl)————5μl
10×Enhancer———————————20μl
产品特点:
1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO平末端克隆载体。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)批发关键词:富含纤维的组织,心脏RNA提取试剂盒,纤维类组织RNA提取试剂盒,骨骼肌RNA提取试剂盒,RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)
·细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒
编号:ALH387
英文名称:Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白与浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的核蛋白与浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白为非变性,有活性,可以用于Western、EMSA、footprinting、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀后破坏细胞膜,释放出浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到核蛋白。本试剂盒可以抽提50个,数量为2×10^6个Hela细胞(约40mg)的样品。可根据需要按比例放大,缩小提取规模。
试剂盒组份:
浆蛋白提取试剂A———————————10ml
浆蛋白提取试剂B———————————0.55ml
核蛋白提取试剂———————————2.5ml
注意事项:
1.需自备PMSF, PMSF一定要在抽提试剂加入到样品前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
2.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3..对于组织样品,本试剂盒仅适合于新鲜组织,对冻存过的组织抽提效果差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。
4.使用本试剂盒抽提得到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白都可以直接用我司的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
储存条件:4℃,有效期12个月。
·骨RNA提取试剂盒
编号:ALH042
英文名称:Bone tissue RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速提取骨组织细胞总RNA,骨组织坚硬、骨细胞密度低、而且外周基质含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA难以分离,无法用传统Trizol法进行高质量提取。本试剂盒采用独特的不含苯酚/氯*(代"仿")配方的裂解液,并添加多种成分去除骨组织蛋白多糖。同时独特基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过, 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在35分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.适应性广泛,可以提取各种骨组织包括矿化骨组织。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代测序和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 50次 |
| 裂解液CLB | 50ml |
| Plantbalb | 5ml |
| 裂解液RLT Plus | 25ml |
| 去蛋白液RW1 | 40ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 50套 |
| 基因组DNA 清除柱和收集管 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵或者其它合适的破碎骨组织装置。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月
RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)批发关键词:富含纤维的组织,心脏RNA提取试剂盒,纤维类组织RNA提取试剂盒,骨骼肌RNA提取试剂盒,RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)
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