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一管式定点突变试剂盒厂商
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One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
472
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应一管式定点突变试剂盒厂商,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:一管式定点突变试剂盒厂商品牌:百奥莱博编号:ALH355英文名:One Tube Site-specific Mutagenesis Kit规格:10次|20次本试剂盒是基于PCR原理向目的DNA*(代"片")段(一般为质粒)中引入碱基的点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的,PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板,利用超快高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成(非甲基化,包含突变点,且有两个缺刻点nick点),再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ,剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后,质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复,得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。本试剂盒适用于<12kb甲基化质粒中核苷酸的突变。试剂盒组分(10次):SuperPfu DNA polymerase——————5μl10×SuperPfu Buffer————————100μlDpn I——————-——————-——5μl10mM dNTP Mixture-——————-——25μl试剂盒特点:1、简单,一个PCR管中完成所有操作,速度最快。2、采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。3、效率高,使用Dpn I去除非突变模板,突变效率高达90%;不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。储存条件:-20℃,有效期一年。本品别名:一管式定点突变试剂盒|一管式突变试剂盒想要了解更多关于一管式定点突变试剂盒厂商的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:BTN100209 Bst DNA聚合酶,大片段 Bst DNA Polymerase,Large Frag.PY02-237 精氨酸葡萄糖斜面琼脂 100克 维生素BT Heparin sodium 541-15-1BL0961 封闭用马血清(原液)ARB13439 鸡生长激素(GH)Elisa方法检测 Chicken growth hormone,gh ELISA KITBTN131143 AMPPD AMPPD(苯并三氮唑-1-基氧基)二哌*(代"啶")碳六氟磷酸盐 Ceftiofur Sodium 190849-64-0或206752-41-2头孢唑啉钠 Deoxycholic acid 27164-46-11637-39-4 Trans-Zeatin 反玉米素N6-苯甲酰基腺嘌呤 Ethanethioamide 4005-49-6ARB12445 大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)酶免分析 Rat helicobacter pylori igg,hp-igG ELISA KITARB13920 猪角化细胞生长因子(KGF)尿液中含量检测 Porcine keRatinocyte growth factor,kgf ELISA KITPY01-133 D-果糖 25克 L-胱硫醚 Indomethacin 56-88-2一管式定点突变试剂盒厂商关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒肽聚糖 Dextran 27814-48-8ARB13142 小鼠总胆汁酸(TBA)酶联免疫定量检测 顺乌头酸 L-(+)-Lyxose 585-84-2ARB10387 人可溶性CD40配体(sCD40L)elisa检测说明书 Human soluble cluster of differentiation 40 ligand,scd40l ELISA KITPY08-082 胰蛋白胨大豆琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于药品中需氧微生物总数测定A4016-28 山羊血清 100ml|500ml79-06-1 丙烯酰胺 Acrylamide硫代甜菜碱8 BOC-D-Glutamic acid 15178-76-4胆红素 Methyl laurate 635-65-4L-鼠李糖 2,4-Dimethoxybenzaldehyde 10030-85-0ARB13670 兔主要组织相容性复合体I类(MHCI/RLAI)Elisa分析 Rabbit major Histocompatibility complexi,mhci/rlai ELISA KITARB12702 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa测定使用说明书 Rat glycogen synthase kinase,gsk ELISA KITARB13293 小鼠糖化血红蛋白A1c Elisa方法检测 Mouse glycated hemoglobin a1c ELISA KITBTN130802 ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒 ADP/ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit7240-90-6 X-galPY02-364 石蕊牛奶培养基 250克 ARB10535 人包膜蛋白gp120(Gp120)elisa测定使用说明书 Human envelope protein gp120 (Gp120) ELISA KIT一管式定点突变试剂盒厂商关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒·组织细胞DNA/RNA分离提取试剂盒编号:ALH023英文名称:Tissue cell DNA/RNA Extraction Kit规格:50次本试剂盒设计用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物DNA/RNA同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而RNA穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。试剂盒特点:1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。2.快速,简捷,单个样品RNA/基因组DNA分离提取操作一般可在40分钟内完成。3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。4. 多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。试剂盒组份(50次):裂解液RLT Plus———————————50ml去蛋白液RW1—————————————40ml漂洗液RW——————————————10mlRNase-free H2O———————————10ml70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(第一次使用前按说明加指定量乙醇)抑制物去除液IR———————————25ml漂洗液WB——————————————15ml洗脱缓冲液EB————————————10ml基因组DNA吸附柱和收集管———————50套RNA吸附柱和收集管——————————50套注意事项:1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×10^6细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3~4×10^6,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。3. 裂解液RLT Plus、抑制物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。4. 预防RNase污染,应注意以下几方面:1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。3) RNA在裂解液RLT Plus中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。4) 配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)5. 关于DNA的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本公司的组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。3) 将RNA提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。6. RNA纯度及浓度检测:完整性: RNA可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA条带。动物rRNA大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S和18SrRNA。动物RNA样品中最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯。浓度:取一定量的RNA提取物,用RNase-free水稀释n倍,用RNase-free水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。储存条件:室温,有效期12个月。
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