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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Oligonucleotide purification kit
- 库存:
945
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货小片段标记探针纯化回收试剂盒特价优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货小片段标记探针纯化回收试剂盒特价优惠
规格:50次
品牌:百奥莱博
英文名:Oligonucleotide purification kit
编号:ALH105
本试剂盒使用特殊的结合缓冲液能够高效纯化>15nt的单链或者双链DNA和RNA。特别适用于从标记反应(地高*(代"辛")标记,同位素标记,生物素标记等)混合物中回收小片段标记探针,去除未反应的核苷酸、短oligos、染料、酶、盐离子等。典型的回收率高达80-90%,每个离心吸附柱每次可吸附的 DNA 量为 10µg 。使用本试剂盒回收的RNA或者DNA可适用于in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、Ligation、Sequencing、Microarray analysis等实验。
试剂盒组份(50次):
平衡液————————————5ml
结合液OB———————————30ml
漂洗液RW———————————10ml
RNase-free H2O————————10ml
吸附柱和收集管(2ml)-—————50套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
2.使用了优质结合液,不含传统结合液的碘化*(代"钠")和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。并且适用于回收单链或者双链DNA和RNA。
4.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。
2. 结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有核酸片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
4. 虽然本试剂盒推荐用于回收小片段或者寡聚核苷酸(>15nt),但是也可以高效回收<10kb的较大片段DNA或者RNA。
5. 回收RNA应该用本试剂盒带的RNase free H2O来洗脱。并保存在-70℃。DNA*(代"片")段也可以根据需要用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),如果担心EDTA可能影响下游反应,使用时可以适当稀释。或者可以直接用(10mM Tris-HCl pH 8.0)洗脱。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:寡核苷酸纯化回收试剂盒|短链RNA提取试剂盒|短链DNA提取试剂盒|短链RNA纯化回收试剂盒|短链DNA纯化回收试剂盒|小片段标记探针纯化回收试剂盒
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·组织细胞miRNA提取试剂盒
编号:ALH072
英文名称:Tissue Cell microRNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。
产品组分:
Lysis/Binding buffer————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。 克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,氯*(代"仿"),一次性注射器,研钵。
4. Lysis/Binding buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月。(Lysis/Binding buffer需4℃避光保存)
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的方法多是用酚氯仿抽提溶液后乙醇沉淀,由于有些多糖沉淀属性和DNA相似时就容易共沉淀下来。鉴于竞争的日趋激烈,纯化试剂价格逐渐向下,连核酸纯化领域的顶级名牌Qiagen也开始大幅度的折扣优惠,所以,有条件还是选择试剂盒,比自己慢慢摸索要更能节约宝贵的青春。所以,这里准备将回收片断按照大小不同来分别介绍不同用途的产品: 常规片断级(DNA片段为100bp-10kb):主流方法是柱回收试剂盒 大片段级(DNA片段>7kb):可选方法是玻璃奶/纯化填料胶回收试剂盒,电洗脱
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