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- 详细信息
- 技术资料
- 免疫原:
GAPDH
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
Rat、Mouse、Human、Zebrafish、Rabbit
- 保质期:
二年
- 目录编号:
SY0636
- 级别:
多克隆
- 库存:
495
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
兔
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
GAPDH
- 抗体英文名:
GAPDH, Rabbit pAb
- 抗体名:
兔抗GAPDH多克隆多克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货兔抗GAPDH多克隆抗体打折促销在内的一系列抗体抗原产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货兔抗GAPDH多克隆抗体打折促销
产地:国产|进口
编号:SY0636
品牌:百奥莱博
规格:40μl(>40次)
本品为兔抗GAPDH多克隆抗体,兔抗磷酸甘油醛脱氢酶多克隆抗体。推荐稀释倍数:WB(1:2000)
GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase),即磷酸甘油醛脱氢酶,可催化甘油醛-3-磷酸向1,3双磷酸甘油酸的转化,是糖酵解的关键酶之一。
GAPDH几乎在所有组织和细胞中都高水平表达,且作为看家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此,在Western blot检测中,被广泛的用作蛋白质标准化内参。
产品类型:兔多抗(Rabbit Polyclonal, pAb)IgG,内参抗体
反应性:Rat、Mouse、Human、Zebrafish、Rabbit
应用:WB
检测分子量(Molecular Wt.):36kDa
储存缓冲液:1*TBS (pH7.4), 无菌抽滤
免疫原:KLH-多肽交联物
纯化方式:多肽亲和纯化
储存条件:-20℃。
北京现货兔抗GAPDH多克隆抗体打折促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
编号:SY0506
英文名称:MTT Cell Proliferation Assay Kit
规格:500T
本试剂盒以MTT(高纯度)作为指示剂,在经典操作步骤的基础上,采用独特的甲臜溶解液配方,可以直接溶解甲臜沉淀,无需去除原有的培养液。从而避免因去除培养液时甲臜被部分去除而引起的操作误差。具有本底低,灵敏度高,线性范围宽,操作简单等特点。另外,本试剂盒还提供配套的一次性针头过滤器和注射器,为实验带来更多的便利。
噻唑兰(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也称作溴化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法,用来检测细胞的活力,细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于:MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶,而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来,酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比,用以评估细胞存活状况。
产品组份:
MTT粉末——————25mg
MTT溶剂——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套装—————1包
注意事项
1)甲臜溶解液具有腐蚀性和毒性,使用时注意防护。
2)MTT有致癌性,应小心操作;MTT溶液需要无菌,因其对菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超过1周,因其可能发生降解,导致检测结果错误。
3)MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT吸光度最好在0-0.7范围内。
4)使用微孔板进行检测,如果细胞培养时间比较长,需要注意蒸发的问题。一般情况,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,建议弃用周围一圈的方法,改加PBS,水或者细胞培养液等。也可通过将96孔板放在靠近培养箱内水源的位置,以减缓蒸发现象。
5)甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀,只需37℃水浴使其充分溶解,混匀后即可使用。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃,有效期1年
北京现货兔抗GAPDH多克隆抗体打折促销关键词:GAPDH多克隆抗体,兔抗GAPDH,兔抗GAPDH多克隆抗体,SY0636,GAPDH抗体
虎红 Merrifield resin 632-69-9
BTN131039 即用型EMSA试剂盒 EMSA Kit
ARB10212 人β甘露糖苷酶(β MAnAse)elisa检测 Human α mannosidase,α manase ELISA KIT
PY02-397 APT琼脂 250克
BTN81214 Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉) Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer
ARB13576 兔子白介素4(IL-4)Elisa方法检测 Rabbit interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
D-半乳糖醛酸 TES 91510-62-2
ARB10802 人抗丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)代做ELISA实验 Human anti-hepatitis c virus antibody,anti-hcv ELISA KIT
51707-55-2 Thidiazuron (TDZ) 噻苯隆
367-93-1 IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
ARB11788 人酸性成纤维细胞生长因子1(AFGF-1)ELISA检测服务 Human acidic fibroblast growth factor 1,afgf-1 ELISA KIT
三异辛胺 DABITC 25549-16-0
85-61-0 辅酶A Coenzyme A hydrate(COA)
BL1300 pUC18
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·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
编号:SY0467
英文名称:Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
规格:100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒,可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照,可进行达100个样品的检测。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,简写为ALP或AKP),又称碱性磷酸酯酶,是一组同工酶,目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解,从而将底物分子上的磷酸基团去除,转化为羟基。此类底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等;生物学中碱性磷酸酶(ALP)水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标,如:1)作为iPS成功诱导的标志;ALP在大多数细胞类型中均有表达,但是在iPS细胞内的表达水平明显升高;2)结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标;3)血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症,常被认为和恶性胆管阻塞,原发性硬化胆管炎,肝癌,肝硬化等肝胆疾病密切相关;4)血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成,以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关;5)碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况,多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说,血清内ALP的范围为40-150U/L。
对硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,碱性条件下,可在ALP作用下生成对硝基苯酚(p-nitrophenol, pNP),后者在碱性环境下呈黄色产物,并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深,说明ALP活性越高,反之则活性越低。因此,通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。
产品规格:
| ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer | 15ml | -20℃ |
| 显色底物 pNPP Substrate | 2管 | -20℃避光 |
| pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard | 100ul (10mM) | -20℃避光 |
| 反应终止液 Stop Solution | 12ml | -20℃ |
储存条件:-20℃,有效期一年。
注意事项
1) 如果进行酶活力的绝对定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐孵育30min等较长时间,以减小操作过程中的时间误差。如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
2)样品溶液中须避免出现EDTA、氟离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶抑制剂。
3)ALP反应缓冲液和p-nitrophenol标准品溶液对人体有害,请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 试剂准备
将所有试剂取出,恢复至室温使用。
1) 显色底物溶液:取一管显色底物,溶解于2.5ml的ALP反应缓冲液中,充分溶解和混匀,冰上放置。注意:新鲜配制的显色底物溶液需在数小时(≤ 6h)内使用。
2) 标准品工作液:取10μl p-nitrophenol标准品溶液(10mM),用ALP反应缓冲液稀释至0.2ml,使得终浓度为0.5mM。
2.样品准备
1) 细胞或组织裂解液的准备:采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞和组织,如果有必要需进行适当匀浆,随后离心取上清,用于ALP活性的检测。注意:裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存,避免反复冻融。
2) 血浆、血清和尿液的准备:血浆和血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。注意:血浆制备不能用含EDTA和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻存,避免反复冻融。
3) 样品的稀释:若样品中含有较高活性的ALP,可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释,也可以采用试剂盒中的ALP反应缓冲液进行稀释。若使用上述反应缓冲液进行稀释,需保留足够的缓冲液用于试剂盒的检测过程。
3.加样
参考下表使用96孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为4、8、16、24、32和 40μl,样品通常可以直接加50μl。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
表1 各组分加样数据表
| 空白对照(Blank) | 标准品(Standard) | 样品(Sample) | |
| ALP反应缓冲液 | 50μl | (100-x)μl | (50-y) μl |
| 显色底物 | 50μl | - | 50μl |
| 样品 | - | - | yμl |
| 标准品工作液 | - | xμl | - |
4. 混匀:用枪头轻轻吹打混匀,也可借助摇床进行混匀。
5. 孵育:37℃孵育5-10min。(待测样品中ALP活性较低时,可适当延长孵育时间至30min)
6. 终止:每孔加入100μl反应终止液终止反应。此时,标准品或有ALP活性的孔会呈现不同深浅的黄色。
7. 检测:405nm测定吸光度。如果不能测定405nm,也可以在400-415nm范围内检测吸光度。如果不能立即测定,可以在数小时内完成测定,所显现的黄色在数小时(≤ 6h)内稳定。
8. 结果分析
碱性磷酸酶活性单位的定义:在pH9.8的二乙醇胺(diethanolamine, DEA)缓冲液中,37℃条件下,每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位,也被称作一个DEA酶活力单位。在pH9.6的甘氨酸缓冲液中,25℃条件下,每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位,也被称作一个甘氨酸酶活力单位。一个甘氨酸酶活力单位约相当于3个DEA酶活力单位。本试剂盒测定的是DEA酶活力单位。
最后,根据酶活性单位的定义,计算出样品中的碱性磷酸酶活性。
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