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2×Long PCR Master Mix (No Dye)
942
北京百奥莱博科技有限公司
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售SY0032型2×Long PCR Master Mix(不含染料)哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:SY0032型2×Long PCR Master Mix(不含染料)哪里卖
编号:SY0032
规格:1ml
品牌:百奥莱博
英文名:2×Long PCR Master Mix (No Dye)
Long PCR Master Mix (No Dye)包含Long Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3"→5’外切酶活性(校对活性)的蛋白组成的混合酶,保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。配合独特的缓冲体系,Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。
Mix中不含有溴酚蓝染料,其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50 μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增dystrophin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 Kb条带。
操作注意事项
由于Long Taq DNA Polymerase在室温下也有一定的反应活性,建议在冰上配制PCR反应体系,再置于PCR仪上进行扩增。这样有利于提高扩增的特异性,减少非特异扩增,得到良好的PCR结果。
引物设计注意事项
1)引物3’端最后一个碱基最好为G或者C;
2)引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配;
3)引物3’端尽量避免发夹结构出现;
4)引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5)引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6)引物的GC含量控制在40%-60%之间;
7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
除SY0032型2×Long PCR Master Mix(不含染料)哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
编号:SY0467
英文名称:Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
规格:100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒,可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照,可进行达100个样品的检测。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,简写为ALP或AKP),又称碱性磷酸酯酶,是一组同工酶,目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解,从而将底物分子上的磷酸基团去除,转化为羟基。此类底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等;生物学中碱性磷酸酶(ALP)水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标,如:1)作为iPS成功诱导的标志;ALP在大多数细胞类型中均有表达,但是在iPS细胞内的表达水平明显升高;2)结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标;3)血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症,常被认为和恶性胆管阻塞,原发性硬化胆管炎,肝癌,肝硬化等肝胆疾病密切相关;4)血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成,以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关;5)碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况,多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说,血清内ALP的范围为40-150U/L。
对硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,碱性条件下,可在ALP作用下生成对硝基苯酚(p-nitrophenol, pNP),后者在碱性环境下呈黄色产物,并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深,说明ALP活性越高,反之则活性越低。因此,通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。
产品规格:
ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer | 15ml | -20℃ |
显色底物 pNPP Substrate | 2管 | -20℃避光 |
pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard | 100ul (10mM) | -20℃避光 |
反应终止液 Stop Solution | 12ml | -20℃ |
空白对照(Blank) | 标准品(Standard) | 样品(Sample) | |
ALP反应缓冲液 | 50μl | (100-x)μl | (50-y) μl |
显色底物 | 50μl | - | 50μl |
样品 | - | - | yμl |
标准品工作液 | - | xμl | - |
北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购SY0032型2×Long PCR Master Mix(不含染料)哪里卖。
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