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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pMD19-Simple-Control
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pMD19-Simple-Control
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0451 | pMD19-Simple-Control | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Lac/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;克隆质粒 |
| 质粒大小: | 2693bp |
| 质粒标签: | LacZ |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 5'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
| 3'测序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
| 备注: | 制备T载体 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验18/19T然后再切下来,因为可以保存引物位点(当然引物不能含酶切位点),切得是MCS提供的位点;再后来想了一个更好的办法是用M13-47和RMV引物括了再切(这两个引物在MCS以外),片断浓度大,不需提质粒,没有RNA干扰。注意不是pMD simple而是pMD,前者是没有酶切位点的。 4:连接:这是最痛心的事情,前一阵一个月没连上一个,最近两天连了三个。自己认为片断浓度问题倒是好说,但是必须保证片断的纯度。那一个月迷信TAKARA片断回收试剂盒,方便,但是里面的醇和RNA并没有除净;切胶回收就连上
总体积 10μL *1 pMD18-T Simple Vector的使用量 取0.5μL可得到满意的结果。实际操作时,可按需要确定载体的使用量。pMD18-T Simple Vector 1μL(50 ng)的摩尔数约为0.03 pmol。 *2 Insert DNA的使用量 在进行克隆时,Vector
商品化的T载体有很多。本实验采用TaKaRa公司的pMDTM18-T Simple Vector。这个载体以pUC19载体为基础,消除了pUC18载体上的多克隆酶切位点,经EcoRⅤ酶切后在两侧的3'端添上“T”制备而成(见附录1)。由于本载体上消除了多克隆酶切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。 【试剂与器材】
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