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- 2025年07月16日
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文献和实验荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）基础知识
剂，以消除不需用的荧光。因此荧光物质的保存应注意避免光（特别是紫外光）的直接照射和与其他化合物的接触。在荧光抗体技术中常用一些非荧的色素物质如亚甲蓝、碱性复红。伊文思蓝或低浓度的过锰酸钾、碘溶液等对标本进行得当复染，以减弱非特异性荧光本质，使特异荧光更突出显示。 二、荧光物质 许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有： 1．异硫氰酸荧
光显微镜观察，激光滤片为QB24，压制滤片为TB8，经显微镜观察，发绿色荧光。绿色荧光的是有活力的，而发红色荧光的是无活力的死细胞。4、统计活力。活力以有活力的细胞数占总观察细胞数的百分数表示。 细胞活力（%）=观察到的活细胞数／观察的总细胞数x100(二)染色法1、制备原生质体和细胞材料。2、配制0.005~0.001%的染料。如伊文思蓝、洋红、甲基蓝等。3、用染料处理数分钟，染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色。4、染色过的细胞材料，放在显微镜下观察。凡未染或染色及浅的细胞是有活力
。 [麻醉] 硬膜外麻醉。 [手术步骤] 1.体位 侧卧位。 2.切口、显露 经第11肋间切口分离肾脏，充分显露肾蒂，检查肾蒂淋巴管有无扩张，肾蒂周围组织有无淋巴水肿。然后将0.5%伊文思蓝1ml注入肾蒂周围组织，5分钟后肾蒂淋巴管即可显示。 3.分离、结扎及切断肾蒂淋巴管 用弯或直角止血钳将肾蒂淋巴管及疏松组织从肾动、静脉周围以及动、静脉之间分离，分别结扎后切断，使肾盂及输尿管上端与周围的疏松组织分离。 4.分出一支较粗
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