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文献和实验(RNA interference ,RNA i) 通路中,长片断的双链RNA 进入细胞后会被一个类似RNase III 的内切核糖核酸酶(Dicer) 降解为一系列的21―23bp 长度,3’端有两个碱基突出(带羟基)5’磷酸化的siRNA s 。这些siRNA s 介导同源转录本的降解,从而导致基因表达沉默。( 1-5)大肠杆菌Escherichia coli RNase III 参与多种细菌RNA s,噬菌体甚至是质粒来源的RNA s 降解(6-9) ,能够将长片断的双链RNA s降解为一系
Mol Cell:杨薇等揭示 DNA-PK 的激活机制以及自磷酸化对 NHEJ 通路的重要作用
DNA 双链断裂可由外在因素(电离辐射和活性氧等)或内在因素(DNA 复制错误和 V(D)J 重组等)造成,从而激发 DNA 损伤应答,包括 DNA 修复、细胞周期调控、细胞衰老和细胞凋亡等。 DNA 损伤应答由 PIKK(phosphoinositide-3-kinase-related kinase)家族蛋白激酶催化下游蛋白的磷酸化而启动,包括 DNA-PK(DNA 依赖性蛋白激酶)、ATM(Ataxia Telangiectasia Mutated)和 ATR(ATM-Related
不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。 ②梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。 ③混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者
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