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Origami B (DE3)化学感受态

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  • ¥800 - 2580
  • ATCC
  • 美国
  • AC00044
  • 2025年07月08日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Origami B (DE3) Chemically Competent Cell

    • 库存

      20

    • 供应商

      沪震生物

    • 规格

    Origami B (DE3)化学感受态

    产品信息
    货号 名称 产品形式 规格 储存
    AC0044 Origami B (DE3)
    Chemically Competent Cell
    液体 100μl -80℃

    使用说明
    1、本产品采用干冰运输,收到后请直接冻存于-80℃冰箱。
    2、取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化;
    3、加入1μl纯质粒,轻轻吹打混匀,冰浴30min;
    4、将菌液放入42℃水浴中热激45sec,立即放入冰浴中2min;
    5、加入900μl SOC/LB培养基,于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育;
    6、将菌液5000rpm×5min离心,弃尽上清;
    7、取100μl新鲜LB培养基将菌体打散,均匀涂布于对应抗性平板表面;
    8、平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕,再倒置37℃培养过夜。

    基因型
    F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB (KanR, TetR)

    菌株介绍
    Origami B系列菌株同样具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突变,但是该菌株是来源于BL21的lacZY基因突变株。所以,Origami B系列感受态细胞是集合BL21,Tuner和Origami三种细胞株的优点于一身。
    在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
    TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。
    Origami B(DE3)感受态细胞来源于含有lacZY基因突变的BL21菌株,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。
    形成二硫键,促溶蛋白

    注意事项
    1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    2、本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
    3、混入质粒或连接产物时应轻柔操作,感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
    4、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    5、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    6、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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    图标文献和实验
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