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文献和实验收集足月顺产或剖腹产新生儿脐带，保存于5%糖盐水中，4℃。脐带在4℃ 5%糖盐水中保存时间不超过24h。在超净工作台上将脐带取出，置灭菌弯盘中，用生理盐水冲洗脐静脉至冲出的液体不含红细胞。钳闭脐带一端，从另一端向脐静脉内注入37℃预热的0.25%胰蛋白酶，钳闭另一端。置37℃的生理盐水中10~15min。取出脐带，松开一端钳子，放出消化液，加入含15%新生小牛血清的M199培养基[含有85ml M199培养基(1000ml M199培养基，0.292g谷氨酰胺，3.0g Hepes ，2.0g
条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件： 7、为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 8、L－谷氨酰胺
2005-4-30 陆新江 一、建细胞间的一些细节问题： 1 、甲醛薰蒸： 资料（ internet ）： 40 ％甲醛溶液 ( 药用规格、福建三明化工总厂出品 ) ，用量 30 ml ／ m3 ，室内温度 21 ～ 24 ℃ ，相对湿度 75 ％～ 85 ％，加热薰蒸使蒸汽弥漫全室，关闭门窗 1 h 。 甲醛水溶液为无色，具有强烈刺激
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