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文献和实验要设立对照。该法可用于多样本、多位点甲基化的检测，样本需要量少，适于临床样本，但存在假阳性问题。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析（methylation sensitive dot blotassay，MS-DBA） G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法，能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是：先用重亚硫酸盐处理待测DNA片段，随后以非CG区的引物行PCR扩增，将扩增产物变性后转移到尼龙膜上，用3'端DIG标记的含有2个CG（或TG）的双核苷酸探针与DNA
7.4）TBS洗10min.（10）兔抗SPAIgGl:400稀释，37℃ 30min.（11）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.（12）滴加PAGlonm 1:60稀释，室温1h,或37℃ 30min.（13）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.（14）1%戊二醛洗10min.（15）双蒸水洗5min.（16）1%明胶洗5min.（17）银避光显影8~15min. （18）双蒸水洗15min. （19）固定：用显影定影液（1:4或1:10）固定5min,也可以用15
化状态有三种：持续的低甲基化状态,如管家基因；去甲基化状态,如发育阶段中的一些基因；高度甲基化状态,如女性的一条失活的X染色体[4]。 哺乳动物中，CpG序列在基因组中出现的频率仅有1%，远低于基因组中的其它双核苷酸序列。但在基因组的某些区域中，CpG序列密度很高，可以达均值的5倍以上，成为鸟嘌呤和胞嘧啶的富集区，形成所谓的CpG岛[5]。通常，CpG岛大约含有500多个碱基。 在哺乳动物基因组中约有4万个CpG岛，而且只有CpG岛的胞嘧啶能够被甲基化[6]，CpG岛通常位于基因的启动子区或是第一
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